Gratias tibi ago quod nature.com invisisti. Versio navigatri quam uteris limitatam sustentationem CSS habet. Pro optima experientia, commendamus ut recentissima versione navigatri utaris (vel modum compatibilitatis in Internet Explorer deactivare). Praeterea, ut continua sustentatio praestetur, hic situs stilos vel JavaScript non continebit.
Melaminum est contaminans cibi agnitum quod in quibusdam categoriis ciborum et casu et consulto adesse potest. Propositum huius studii erat detectionem et quantificationem melamini in lacte infantili et lacte pulvere verificare. In summa, quadraginta exempla ciborum commercialiter praesto, inter quae lac infantile et lac pulvereum, ex variis regionibus Iraniae analysata sunt. Quantitas melamini approximata exemplorum determinata est utens systemate chromatographiae liquidae altae efficaciae-ultravioletae (HPLC-UV). Curva calibrationis (R2 = 0.9925) constructa est ad detectionem melamini in intervallo 0.1–1.2 μg mL−1. Limites quantificationis et detectionis erant 1 μg mL−1 et 3 μg mL−1, respective. Melaminum in lacte infantili et lacte pulvere examinatum est et eventus demonstraverunt gradus melamini in exemplis lactis infantilis et lactis pulveris fuisse 0.001–0.095 mg kg−1 et 0.001–0.004 mg kg−1, respective. Hi valores legibus Unionis Europaeae et Codici Alimentario congruunt. Interest notare consumptionem horum lacticiniorum cum melaminae contento imminuto periculum grave valetudini emptorum non afferre. Hoc etiam ex resultatibus aestimationis periculi confirmatur.
Melaminum est compositum organicum formula moleculari C3H6N6, a cyanamide derivatum. Solubilitatem in aqua minimam habet et circiter 66% nitrogenii continet. Melaminum est compositum industriale late adhibitum cum ampla varietate usuum legitimorum in productione plasticarum, stercorantium, et instrumentorum ad cibum praeparandum (inclusa involucris cibariis et vasa coquinaria)1,2. Melaminum etiam ut vector medicamentorum ad morborum curationem adhibetur. Magna proportio nitrogenii in melamino ad abusum compositi et ad proprietates molecularum proteinicorum ingredientibus cibariis impertiendas ducere potest3,4. Ergo, additio melamini ad cibos, inter quos lacticiniis, contentum nitrogenii auget. Ita, erronee conclusum est contentum proteinicorum lactis maius esse quam revera erat.
Pro quolibet grammo melamini addito, copia proteinorum in cibo 0.4% augebitur. Attamen melamini in aqua valde solubilis est et damnum gravius ​​inferre potest. Additio 1.3 grammatum melamini rebus liquidis, ut lacte, copiam proteinorum in lacte 30% augere potest5,6. Quamquam melamini cibis animalibus et etiam humanis additur ad copiam proteinorum augendam7, Commissio Codex Alimentarius (CAC) et auctoritates nationales melamini ut additivum cibarium non probarunt et eam periculosam in tabulam dederunt si deglutitur, inhalatur, vel per cutem absorbetur. Anno 2012, Institutum Internationale pro Investigatione Cancri Organizationis Mundialis Salutis (OMS) melamini ut carcinogenum Classis 2B enumeravit quia saluti humanae noxium esse potest8. Diuturna expositio melamini cancrum vel damnum renum causare potest2. Melaminum in cibo cum acido cyanurico complexum facere potest ad crystallos flavos insolubiles in aqua formandos, qui damnum renum et textus vesicae, necnon cancrum tractus urinarii et detrimentum ponderis inferre possunt9,10. Intoxicationem alimentariam acutam et, in magnis concentrationibus, mortem, praesertim in infantibus et pueris parvis, causare potest.11 Organizatio Mundi Sanitatis (OMS) etiam dosis quotidiana tolerabilis (TDI) melamini hominibus ad 0.2 mg/kg ponderis corporis per diem statuit, secundum normas CAC.12 Administratio Ciborum et Medicamentorum Civitatum Foederatarum (FDA Civitatum Foederatarum) maximum residuum melamini ad 1 mg/kg in lacte infantili et 2.5 mg/kg in aliis cibis statuit.2,7 Mense Septembri 2008, nuntiatum est complures artifices domesticos lactis infantilis melamininam lactis pulveris addidisse ad augendum contentum proteini productorum suorum, quod intoxicationem pulveris lactis effecit et incidentum intoxicationis melamini per totam nationem excitavit, qui plus quam 294,000 pueros aegrotavit et plus quam 50,000 in nosocomio recepit.13
Lactatio non semper fieri potest ob varias causas, ut difficultates vitae urbanae, morbum matris vel infantis, quae ad usum lactis infantilis ad infantes alendos ducit. Quam ob rem, officinae conditae sunt ad lac infantile producendum quae quam proxime lacti materni compositione sit14. Lac infantile in foro venditum plerumque ex lacte vaccino fit et plerumque ex mixtura speciali adipum, proteinorum, carbohydratorum, vitaminorum, mineralium aliorumque compositorum conficitur. Ut proxima sit lacti materni, copia proteinorum et adipum in lacte variat, et secundum genus lactis, compositis ut vitaminis et mineralibus ut ferro15 augetur. Cum infantes sint coetus sensibilis et periculum veneficii exstet, securitas consumptionis lactis pulveris maximi momenti est ad salutem. Post casum veneficii melamini inter infantes Sinenses, nationes toto orbe terrarum huic rei diligenter attenderunt, et sensibilitas huius areae etiam aucta est. Ergo, imprimis interest moderationem productionis lactis infantilis firmare ad salutem infantium protegendam. Variae methodi ad melaminim in cibo detegendum existunt, inter quas chromatographia liquida altae efficaciae (HPLC), electrophoresis, methodus sensoria, spectrophotometria et assay immunosorbens enzymaticus antigeni-anticorporis16. Anno 2007, Administratio Ciborum et Medicamentorum Civitatum Foederatarum (FDA) methodum HPLC ad melamini et acidi cyanurici in cibo determinandos elaboravit et publicavit, quae methodus efficacissima est ad contentum melamini determinandum17.
Concentrationes melamini in lacte infantili, per novam methodum spectroscopiae infrarubrae mensuratae, a 0.33 ad 0.96 milligrammata per kilogramma (mg kg-1) variabant.18 Studium in Sri Lanka invenit gradus melamini in pulvere lactis integri a 0.39 ad 0.84 mg kg-1 variare. Praeterea, exempla lactis infantilis importata summos gradus melamini continebant, 0.96 et 0.94 mg/kg respective. Hi gradus infra limitem regulamentarium (1 mg/kg) sunt, sed programma monitorium propter salutem emptorum necessarium est.19
Plura studia gradus melamini in lactibus infantilibus Iranicis examinaverunt. Circa 65% exemplorum melaminim continebant, cum media 0.73 mg/kg et maxima 3.63 mg/kg. Aliud studium rettulit gradum melamini in lacte infantili a 0.35 ad 3.40 μg/kg variasse, cum media 1.38 μg/kg. In universum, praesentia et gradus melamini in lactibus infantilibus Iranicis in variis studiis aestimati sunt, quibusdam exemplis melaminim continentibus limitem maximum ab auctoritatibus regulatoriis statutum (2.5 mg/kg/pabulum) excedentibus.
Cum ingens consumptio lactis pulveris, sive directa sive indirecta, in industria alimentaria et singularis momenti lactis artificialis in alendis pueris considerata sit, hoc studium propositum habuit methodum detectionis melamini in lacte pulvere et lacte artificiali probare. Re vera, primum huius studii propositum erat methodum quantitativam celerem, simplicem et accuratam ad adulterationem melamini in lacte artificiali et lacte pulvere detegendam, utens chromatographia liquida altae efficaciae (HPLC) et detectione ultraviolacea (UV). Deinde, huius studii propositum erat contentum melamini in lacte artificiali et lacte pulvere in foro Iraniano venditis determinare.
Instrumenta ad analysin melamini adhibita variantur secundum locum productionis cibi. Methodus analysis HPLC-UV sensibilis et fida adhibita est ad residua melamini in lacte et lacte infantili metienda. Lacticiniis varia proteina et adipes continent quae mensurationem melamini impedire possunt. Ergo, ut Sun et al. 22 notaverunt, strategia purgationis apta et efficax necessaria est ante analysin instrumentalem. In hoc studio, filtra syringea abicienda usi sumus. In hoc studio, columna C18 ad separandum melamini in lacte infantili et lacte pulvere usi sumus. Figura 1 chromatogramma ad detectionem melamini ostendit. Praeterea, recuperatio exemplorum continentium 0.1–1.2 mg/kg melamini a 95% ad 109% variabat, aequatio regressionis erat y = 1.2487x − 0.005 (r = 0.9925), et valores deviationis standardis relativae (RSD) a 0.8 ad 2% variabant. Data praesto indicant methodum fidam esse in ambitu concentrationis studiato (Tabula 1). Limes detectionis instrumentalis (LOD) et limes quantificationis (LOQ) melamini erant 1 μg mL⁻¹ et 3 μg mL⁻¹ respective. Praeterea, spectrum UV melamini zonam absorptionis ad 242 nm ostendit. Methodus detectionis est sensibilis, fidissima et accurata. Haec methodus adhiberi potest ad determinationem cotidianam gradus melamini.
Similia ab pluribus auctoribus divulgata sunt. Methodus chromatographiae liquidae altae efficaciae cum serie photodiodorum (HPLC) ad analysin melamini in productis lacticiniis elaborata est. Limites quantitationis inferiores erant 340 μg kg⁻¹ pro lacte pulvere et 280 μg kg⁻¹ pro lacte infantili ad 240 nm. Filazzi et al. (2012) rettulerunt melamini in lacte infantili per HPLC non detectam esse. Attamen, 8% exemplorum pulveris lactis melaminim ad gradum 0.505–0.86 mg/kg continebant. Tittlemiet et al.23 simile studium perfecerunt et contentum melamini in lacte infantili (numerus exempli: 72) per chromatographiam liquidam altae efficaciae cum spectrometria massae/MS (HPLC-MS/MS) circiter 0.0431–0.346 mg kg⁻¹ esse determinaverunt. In studio a Venkatasamy et al. conducto... (2010), methodus chemiae viridis (sine acetonitrilo) et chromatographia liquida altae efficaciae phasis inversae (RP-HPLC) adhibita sunt ad melamininum in lacte infantili et lacte aestimandum. Concentratio exempli a 1.0 ad 80 g/mL variabat et responsio linearis erat (r > 0.999). Methodus recuperationes 97.2–101.2 per concentrationem a 5–40 g/mL ostendit et reproducibilitas minus quam 1.0% deviationis standardis relativae erat. Praeterea, LOD et LOQ observatae 0.1 g mL−1 et 0.2 g mL−124 respective erant. Lutter et al. (2011) contaminationem melamini in lacte vaccino et lacte infantili lacte fundato per HPLC-UV determinarunt. Concentrationes melamini a < 0.2 ad 2.52 mg kg−1 variabant. Ambitus dynamicus linearis methodi HPLC-UV erat 0.05 ad 2.5 mg kg−1 pro lacte vaccino, 0.13 ad 6.25 mg kg−1 pro lacte infantili cum fractione massae proteini <15%, et 0.25 ad 12.5 mg kg−1 pro lacte infantili cum fractione massae proteini 15%. Resultata LOD (et LOQ) erant 0.03 mg kg−1 (0.09 mg kg−1) pro lacte vaccino, 0.06 mg kg−1 (0.18 mg kg−1) pro lacte infantili <15% proteini, et 0.12 mg kg−1 (0.36 mg kg−1) pro lacte infantili 15% proteini, cum ratione signali ad strepitum 3 et 1025 pro LOD et LOQ, respective. Diebes et al. (2012) gradus melamini in exemplaribus lactis infantilis et pulveris per HPLC/DMD investigaverunt. In lacte infantili, infima et maxima quantitates erant 9.49 mg kg⁻¹ et 258 mg kg⁻¹, respective. Limes detectionis (LOD) erat 0.05 mg kg⁻¹.
Javaid et al. rettulerunt residua melamini in lacte infantili in intervallo 0.002–2 mg kg−1 esse per spectroscopiam Fourier transform infrared (FT-MIR) (LOD = 1 mg kg−1; LOQ = 3.5 mg kg−1). Rezai et al.27 methodum HPLC-DDA (λ = 220 nm) ad melamini aestimandum proposuerunt et LOQ 0.08 μg mL−1 pro lacte pulvere consecuti sunt, quod inferius erat quam gradus in hoc studio obtentus. Sun et al. RP-HPLC-DAD ad melamini in lacte liquido detegendum per extractionem phasis solidae (SPE) evolverunt. LOD et LOQ 18 et 60 μg kg−128 respective obtinuerunt, quod sensibilius est quam studium praesens. Montesano et al. Efficacitatem methodi HPLC-DMD ad aestimandum contentum melamini in supplementis proteinicis cum limite quantificationis 0.05–3 mg/kg confirmavit, quae minus sensibilis erat quam methodus in hoc studio adhibita29.
Sine dubio, laboratoria analytica magnum munus in protectione ambitus agunt per monitorationem inquinantium in variis exemplaribus. Attamen, usus magni numeri reagentium et solventium per analysin formationem residuorum periculosorum efficere potest. Quapropter, chemia analytica viridis (GAC) anno 2000 elaborata est ad effectus adversos procedurarum analyticarum in operarios et ambitum reducendos vel eliminandos26. Methodi traditionales detectionis melamini, inter quas chromatographia, electrophoresis, electrophoresis capillaris, et assay immunosorbentis enzymatici coniuncti (ELISA), ad melaminum identificandum adhibitae sunt. Attamen, inter numerosas methodos detectionis, sensoria electrochemica magnam attentionem attraxerunt propter excellentem sensibilitatem, selectivitatem, tempus analysis rapidum, et proprietates faciles ad usum30,31. Nanotechnologia viridis vias biologicas ad synthesizandum nanomateria utitur, quae generationem vastorum periculosorum et consumptionem energiae reducere possunt, ita promovendo implementationem practicarum sustinabilium. Nanocomposita, exempli gratia, ex materiis ambitus amicabilibus facta, in biosensoribus adhiberi possunt ad substantias ut melaminum detegendas32,33,34.
Studium demonstrat microextractionem phasis solidae (SPME) efficaciter adhiberi propter maiorem efficientiam energiae et sustinabilitatem comparatam cum methodis extractionis traditis. Amicitia erga ambitum et efficacia energiae SPME eam faciunt alternativam optimam methodis extractionis traditis in chemia analytica et praebent methodum magis sustinabilem et efficientem ad specimina praeparanda.
Anno MMXIII, Wu et al. biosensorem resonantiae plasmonis superficialis (mini-SPR) valde sensibilem et selectivum excogitaverunt, qui copulationem inter anticorpora melamini et anti-melaminum adhibet ad melaminum in lacte infantili celeriter detegendum per immunoassay. Biosensor SPR cum immunoassay (albumina serica bovina melamino-coniugata utens) coniunctus est technologia facilis ad usum et vilis pretii cum limite detectionis tantum 0.02 μg mL-136.
Nasiri et Abbasian sensorem portabilem magni potentialis una cum compositis oxidi grapheni-chitosani (GOCS) ad melaminam in exemplaribus commercialibus detegendam adhibuerunt37. Haec methodus selectivitatem, accuratiam, et responsum altissimam ostendit. Sensor GOCS sensibilitatem insignem (239.1 μM−1), ambitum linearem 0.01 ad 200 μM, constantem affinitatis 1.73 × 104, et LOD usque ad 10 nM demonstravit. Praeterea, studium a Chandrasekhar et al. anno 2024 factum modum oecologicum et sumptuum efficientem adoptavit. Extractum corticis papayae ut agentem reducentem ad synthesizandum nanoparticulas oxidi zinci (ZnO-NPs) methodo oecologica adhibuerunt. Deinde, technica singularis spectroscopiae micro-Raman ad determinationem melaminae in formula infantili elaborata est. ZnO-NPs ex vastatione agriculturae derivatae potentiam tamquam instrumentum diagnosticum pretiosum et technologiam fidam et sumptuum humilium ad melaminam monitorandam et detegendam demonstraverunt38.
Alizadeh et al. (2024) suggestum fluorescentem structurae metallo-organicae (MOF) valde sensibilem adhibuerunt ad melaminam in lacte pulvere determinandam. Ambitus linearis et limes detectionis inferior sensoris, determinati utens 3σ/S, erant 40 ad 396.45 nM (aequivalentes 25 μg kg−1 ad 0.25 mg kg−1) et 40 nM (aequivalentes 25 μg kg−1), respective. Hic ambitus multo infra limites residuorum maximos (MRLs) est, qui ad identificationem melaminae in lacte infantili (1 mg kg−1) et aliis exemplaribus cibi/pabuli (2.5 mg kg−1) constituti sunt. Sensor fluorescens (terbium (Tb)@NH2-MIL-253(Al)MOF) maiorem accurationem et facultatem mensurae accuratiorem quam HPLC39 in detegenda melamina in lacte pulvere demonstravit. Biosensores et nanocomposita in chemia viridi non solum facultates detectionis augent, sed etiam pericula environmentalia minuunt, secundum principia progressionis sustinabilis.
Principia chemiae viridis ad varias methodos ad melaminam determinandam adhibita sunt. Una methodus est elaboratio methodi microextractionis dispersivae viridis in phase solida utens polymero polari naturali β-cyclodextrin cum acido citrico reticulato ad extractionem efficientem melaminae 40 ex exemplaribus ut lacte infantili et aqua calida. Alia methodus reactionem Mannich ad melaminam in exemplaribus lactis determinandam utitur. Haec methodus vilis est, amica ambienti, et valde accurata cum ambitu lineari 0.1–2.5 ppm et limite detectionis humili 41. Praeterea, methodus sumptu-efficientis et amica ambienti ad determinationem quantitativam melaminae in lacte liquido et lacte infantili elaborata est utens spectroscopia transmissionis infrarubrae transformatae Fourier cum alta accuratione et limitibus detectionis 1 ppm et 3.5 ppm, respective 42. Hae methodi applicationem principiorum chemiae viridis ad elaborationem methodorum efficacium et sustinabilium ad melaminam determinandam demonstrant.
Plura studia methodos novas ad melamini detegendum proposuerunt, ut puta extractionem phasis solidae et chromatographiam liquidam altae efficaciae (HPLC)43, necnon chromatographiam liquidam altae efficaciae (HPLC) celerem, quae non requirit complexam praeparationem vel reagentia parium ionum, ita quantitatem vastorum chemicorum44 minuens. Hae methodi non solum accuratas conclusiones ad melamini in productis lacticiniis determinandum praebent, sed etiam principiis chemiae viridis obtemperant, usum chemicorum periculosorum minuentes et effectum generalem in ambitum processus analytici minuentes.
Quadraginta exempla diversarum notarum ter examinata sunt, et eventus in Tabula II exhibentur. Gradus melamini in exemplaribus lactis infantilis et lactis pulveris a 0.001 ad 0.004 mg/kg et a 0.001 ad 0.095 mg/kg respective variabant. Nullae mutationes significantes inter tres cohortes aetatis lactis infantilis observatae sunt. Praeterea, melamini in 80% lactis pulveris detecta est, sed 65% lactis infantilis melamino contaminatae erant.
Melamini contentum in lacte pulveris industriali maius erat quam in lacte artificiali infantili, et differentia significativa erat (p<0.05) (Figura 2).
Resultata obtenta infra limites ab FDA statutos fuerunt (infra 1 et 2.5 mg/kg). Praeterea, resultata congruunt cum limitibus a CAC (2010) et EU45,46 statutis, id est, limes maximus permissus est 1 mg kg⁻¹ pro lacte infantili et 2.5 mg kg⁻¹ pro lacticiniis.
Secundum studium anno 2023 a Ghanati et al.47 factum, contentum melamini in variis generibus lactis involucri in Irania a 50.7 ad 790 μg kg−1 variabat. Eorum eventus infra limitem permissum ab FDA fuerunt. Nostra eventus inferiora sunt quam eorum a Shoder et al.48 et Rima et al.49. Shoder et al. (2010) invenerunt gradus melamini in lacte pulvere (n=49) per ELISA determinatos a 0.5 ad 5.5 mg/kg variasse. Rima et al. residua melamini in lacte pulvere per spectrophotometriam fluorescentem analysuerunt et invenerunt contentum melamini in lacte pulvere 0.72–5.76 mg/kg esse. Studium in Canada anno 2011 peractum est ad gradus melamini in formula infantili (n=94) monitorandos utens chromatographia liquida (LC/MS). Concentrationes melamini infra limitem acceptabilem (norma praeliminaris: 0.5 mg kg−1) inventae sunt. Verisimile est fraudulenta melamini gradus detecta fuisse consilium ad augendam copiam proteinorum. Attamen, hoc explicari non potest usu stercorantium, relocatione contentorum vasis, aut similibus factoribus. Praeterea, fons melamini in lacte pulveris in Canadam importato non revelatus est50.
Hassani et al. melamini contentum in lacte pulvereo et lacte liquido in foro Iraniano anno 2013 mensuraverunt et similia invenerunt. Resultata demonstraverunt, praeter unam notam lactis pulveris et lactis liquidi, omnia alia exempla melamino contaminata esse, cum gradibus ab 1.50 ad 30.32 μg g⁻¹ in lacte pulvereo et 0.11 ad 1.48 μg ml⁻¹ in lacte variantibus. Notandum est acidum cyanuricum in nullo exemplorum detectum esse, quod possibilitatem intoxicationis melamini pro consumidoribus minuit. 51 Studia priora concentrationem melamini in productis chocolatis lac pulverem continentibus aestimaverunt. Circa 94% exemplorum importatorum et 77% exemplorum Iranianorum melaminim continebant. Gradus melamini in exemplis importatis ab 0.032 ad 2.692 mg/kg variabant, dum in exemplis Iranianis ab 0.013 ad 2.600 mg/kg variabant. Summa summarum, melamina in 85% exemplorum detecta est, sed una tantum nota specifica gradus supra limitem permissum habebat.44 Tittlemier et al. gradus melaminae in lacte pulvere inter 0.00528 et 0.0122 mg/kg relata sunt.
Tabula III summatim ostendit eventus aestimationis periculi pro tribus cohortibus aetatis. Periculum minus quam 1 erat in omnibus cohortibus aetatis. Ergo, nullum periculum non-carcinogenicum sanitati ex melamina in lacte infantili est.
Minores gradus contaminationis in lacticiniis fortasse ex contaminatione fortuita durante praeparatione oriuntur, dum maiores ex additionibus voluntariis. Praeterea, periculum generale valetudini humanae ex consumptione lacticiniorum cum melaminae gradibus humilibus habetur humile. Concludi potest consumptionem productorum tam humiles melaminae gradus continentium nullum periculum valetudini emptorum afferre.
Cum momentum administrationis salutis alimentariae in industria lacticiniorum habeat, praesertim ad salutem publicam protegendam, maximi momenti est methodum ad melamini gradus et residua in lacte pulvere et lacte infantili aestimandos et comparandos excogitare et validare. Methodus spectrophotometrica HPLC-UV simplex et accurata ad melamini in lacte infantili et lacte pulvere determinandum elaborata est. Methodus validata est ut eius fides et accuratio confirmarentur. Limites detectionis et quantificationis methodi satis sensibiles esse demonstrati sunt ad gradus melamini in lacte infantili et lacte pulvere metiendos. Secundum nostra data, melamini in plurimis exemplaribus Iranicis detecta est. Omnia gradus melamini detecta infra limites maximos permissibiles a CAC statutos erant, quod indicat consumptionem horum generum productorum lacticiniorum periculum saluti humanae non afferre.
Omnia reagentia chemica adhibita gradus analytici erant: melamina (2,4,6-triamino-1,3,5-triazina) 99% pura (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO); acetonitrilum gradus HPLC (Merck, Darmstadt, Germania); aqua purissima (Millipore, Morfheim, Francia). Filtra syringetica disposable (Chromafil Xtra PVDF-45/25, pororum magnitudo 0.45 μm, membranae diameter 25 mm) (Macherey-Nagel, Düren, Germania).
Balneum ultrasonicum (Elma, Germania), centrifuga (Beckman Coulter, Krefeld, Germania) et HPLC (KNAUER, Germania) ad exempla praeparanda adhibita sunt.
Chromatographum liquidum altae efficaciae (KNAUER, Germania) detectore UV instructum adhibitum est. Conditiones analysis HPLC erant hae: systema UHPLC Ultimate columna analytica ODS-3 C18 (4.6 mm × 250 mm, magnitudine particularum 5 μm) (MZ, Germania) instructum adhibitum est. Eluens HPLC (phasis mobilis) mixtura TFA/methanoli (450:50 mL) cum fluxu 1 mL min-1 erat. Longitudo undae detectionis 242 nm erat. Volumen injectionis 100 μL erat, temperatura columnae 20°C. Cum tempus retentionis medicamenti longum sit (15 minuta), proxima injectio post 25 minuta fieri debet. Melaminum identificatum est comparando tempus retentionis et cacumen spectri UV normarum melamini.
Solutio melamini norma (10 μg/mL) aqua exeunte praeparata et in armario frigidario (4°C) a luce remoto conservata est. Solutionem principalem cum phase mobili dilue et solutiones normae operantes para. Quaeque solutio norma septies in HPLC iniecta est. Aequatio calibrationis 10 per analysin regressionis areae apicis determinatae et concentrationis determinatae calculata est.
Lactis vaccini pulveris, quae in commercio praesto sunt (exempla XX) et exempla diversarum generum lactis infantilis e lacte vaccino confecti (exempla XX) ex macellis et pharmacopoliis localibus in Irania empta sunt ad infantes diversarum aetatum (0–6 menses, 6–12 menses, et >12 menses) alendos et ad temperaturam refrigeratam (4°C) usque ad analysin conservata. Deinde, 1 ± 0.01 g lactis pulveris homogeneizati ponderata et cum acetonitrilo:aqua (50:50, v/v; 5 mL) mixta est. Mixtura per 1 min agitata est, deinde in balneo ultrasonico per 30 min sonicata, et denique per 1 min agitata. Mixtura deinde centrifugata est ad 9000 × g per 10 min ad temperaturam ambientem et supernatans in fialam autosampler 2 ml filtratum est, utens filtro syringe 0.45 μm. Percolatum (250 μl) deinde cum aqua (750 μl) mixtum et in systema HPLC iniectum est10,42.
Ad methodum comprobandam, recuperationem, accuratiam, limitem detectionis (LOD), limitem quantificationis (LOQ), et praecisionem sub condicionibus optimis determinavimus. LOD definitum est ut contentum exempli cum altitudine apicis triplo maiore gradu strepitus basalis. Contra, contentum exempli cum altitudine apicis decies maiore ratione signali ad strepitum ut LOQ definitum est.
Responsio instrumenti determinata est utens curva calibrationis constante ex septem punctis datorum. Diversa contenta melamini adhibita sunt (0, 0.2, 0.3, 0.5, 0.8, 1 et 1.2). Linearitas processus calculationis melamini determinata est. Praeterea, varia gradus melamini ad exempla inania addita sunt. Curva calibrationis constructa est iniectione continua 0.1–1.2 μg mL−1 solutionis melamini normae in exempla formulae infantilis et lactis pulveris, eiusque R² = 0.9925. Accuratio aestimata est per repetibilitatem et reproducibilitatem processus et consecuta est iniectione exemplorum primo et tribus subsequentibus diebus (triplicato). Repetibilitas methodi aestimata est calculando RSD % pro tribus diversis concentrationibus melamini additi. Studia recuperationis peracta sunt ad accuratiam determinandam. Gradus recuperationis per methodum extractionis ad tres gradus concentrationis melamini (0.1, 1.2, 2) in exemplaribus lactis infantilis et lactis sicci computatus est9,11,15.
Aestimatio consumptio quotidiana (EDI) hac formula determinata est: EDI = Ci × Cc/BW.
Ubi Ci est medium contentum melamini, Cc est consumptio lactis, et BW est medium pondus puerorum.
Analysis datorum per SPSS 24 peracta est. Normalitas per probationem Kolmogorov-Smirnov examinata est; omnia data probationes non parametricae erant (p = 0). Quapropter, probationes Kruskal-Wallis et Mann-Whitney adhibitae sunt ad differentias significantes inter greges determinandas.
Ingelfinger, Jr. Melaminum et eius effectus in contaminationem globalem ciborum. *New England Journal of Medicine* 359(26), 2745–2748 (2008).
Lynch, RA, et al. Effectus pH in migrationem melamini in pateris puerilibus. Acta Internationalia Contaminationis Ciborum, 2, 1–8 (2015).
Barrett, MP et Gilbert, IH. Dirigendo composita toxica ad interiora trypanosomatum. Progressus in Parasitologia 63, 125–183 (2006).
Nirman, MF, et al. *Aestimatio *in vitro* et *in vivo* dendrimerorum melaminicorum ut vehiculorum liberationis medicamentorum. *Acta Pharmaciae Internationalia*, 281(1–2), 129–132(2004).
Organizatio Mundi Sanitarius. Conventus Peritorum 1–4 ad rationes toxicologicas melamini et acidi cyanurici recensendas (2008).
Howe, AK-C., Kwan, TH et Lee, PK-T. *De toxicitate melamini et ren*. Acta Societatis Americanae Nephrologiae 20(2), 245–250 (2009).
Ozturk, S. et Demir, N. *Elaboratio novi adsorbentis IMAC ad melaminam in lacticiniis identificandam per chromatographiam liquidam altae efficaciae (HPLC).* Acta Syntheseos et Analysis Ciborum 100, 103931 (2021).
Chansuvarn, V., Panic, S. et Imim, A. Simplex spectrophotometria melamini in lacte liquido determinata, reactione viridi Mannich innixa. Spectrochem. Acta Part A Mol. Biomol. Spectrosc. 113, 154–158 (2013).
Deabes, M. et El-Habib, R. Determinatio melamini in lacte infantili, lacte pulveris et exemplaribus pangasii per HPLC/chromatographiam seriei diodorum. *Acta Toxicologiae Analyticae Ambientalis*, 2(137), 2161–0525.1000137 (2012).
Skinner, KG, Thomas, JD, et Osterloh, JD. *De toxicitate melamini.* Acta Toxicologiae Medicae, 6, 50–55 (2010).
Organizatio Mundi Sanitatis (OMS), Toxicologia et aspectus sanitatis melamini et acidi cyanurici: Relatio conventus peritorum collaborativi OMS/FAO a Salute Canadae sustentati, Ottawa, Canada, 1-4 Decembris 2008 (2009).
Korma, SA, et al. Studium comparativum compositionis lipidorum et qualitatis pulveris lactis infantilis lipida structuralia functionalia nova continentis et lactis infantilis commercialis. *European Food Research and Technology* 246, 2569–2586 (2020).
El-Waseef, M. et Hashem, H. *Augmentatio valoris nutritionis, attributorum qualitatis et temporis conservationis lactis infantilis utens oleo palmae.* _Middle East Journal of Agricultural Research_ 6, 274–281 (2017).
Yin, W., et al. *Productio anticorporum monoclonalium contra melaminam et elaboratio methodi ELISA competitivae indirectae ad melaminam in lacte crudo, lacte sicco, et pabulo animalium detegendam.* Acta Chemiae Agriculturae et Ciborum 58(14), 8152–8157 (2010).