Gratias tibi ago quod nature.com invisisti. Versio navigatri quam uteris limitatam sustentationem CSS habet. Pro optima experientia, commendamus ut recentissima versione navigatri utaris (vel modum compatibilitatis in Internet Explorer deactivare). Praeterea, ut continua sustentatio praestetur, hic situs stilos vel JavaScript non continebit.
Hydrogenii sulfur (H2S) multiplices effectus physiologicos et pathologicos in corpus humanum habet. Natrii hydrosulfidum (NaHS) late ut instrumentum pharmacologicum ad effectus H2S in experimentis biologicis aestimandos adhibetur. Quamquam amissio H2S ex solutionibus NaHS pauca tantum minuta durat, solutiones NaHS ut composita donatoria pro H2S in aqua potabili in quibusdam studiis animalium adhibitae sunt. Hoc studium investigavit num aqua potabilis cum concentratione NaHS 30 μM in ampullis rattorum/murium praeparata stabilis manere posset saltem per horas 12-24, ut ab aliquibus auctoribus suggessum est. Solutionem NaHS (30 μM) in aqua potabili para et statim in ampullas aquarias rattorum/murium infunde. Exempla ex apice et interiore ampullae aquariae horis 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 12 et 24 collecta sunt ad contentum sulfidi metiendum methodo caeruleae methylenae. Praeterea, muribus mares et feminae NaHS (30 μM) per duas hebdomadas iniecta sunt, et concentrationes sulfidi serici alternis diebus per primam hebdomadam et fine secundae hebdomadis mensuratae sunt. Solutio NaHS in exemplo ex apice ampullae aquariae sumpto instabilis erat; post horas 12 et 24 respective 72% et 75% decrevit. In exemplis ex interioribus ampullarum aquariarum sumptis, decrementum NaHS intra horas 2 significativa non erat; tamen post horas 12 et 24 respective 47% et 72% decrevit. Iniectio NaHS gradum sulfidi serici murum marerum et feminarum non affecit. In conclusione, solutiones NaHS ex aqua potabili paratae ad donationem H2S non adhibendae sunt, quia solutio instabilis est. Haec via administrationis animalia quantitatibus NaHS irregularibus et minoribus quam expectatis exponet.
Hydrogenium sulfuratum (H2S) ut venenum ab anno 1700 adhibitum est; tamen, eius munus ut molecula biosignans endogena ab Abe et Kimura anno 1996 descriptum est. Per tria decennia praeterita, multae functiones H2S in variis systematibus humanis elucidatae sunt, ad intellegendum ductum esse moleculas H2S donatrices applicationes clinicas in curatione vel moderatione quarundam morborum habere posse; vide Chirino et al. pro recensione recenti.
Natrii hydrosulfidum (NaHS) late adhibitum est ut instrumentum pharmacologicum ad effectus H2S aestimandos in multis studiis culturarum cellularum et animalium5,6,7,8. Attamen, NaHS non est donator H2S idealis quia celeriter in H2S/HS- in solutione convertitur, facile polysulfidis contaminatur, et facile oxidatur et volatilizatur4,9. In multis experimentis biologicis, NaHS in aqua dissolvitur, quod volatilizationem passivam et amissionem H2S10,11,12, oxidationem spontaneam H2S11,12,13, et photolysim14 efficit. Sulfidum in solutione originali celerrime perditur propter volatilizationem H2S11. In vase aperto, tempus dimidiationis (t1/2) H2S est circiter 5 minuta, et eius concentratio circiter 13% per minutum decrescit10. Quamquam hydrogenii sulfidi amissio ex solutionibus NaHS paucis tantum minutis durat, nonnulla studia animalium solutiones NaHS ut fontem hydrogenii sulfidi in aqua potabili per 1-21 hebdomades adhibuerunt, solutionem NaHS continentem singulis 12-24 horis substituentes.15,16,17,18,19,20,21,22,23,24,25,26 Haec praxis cum principiis investigationis scientificae non congruit, cum doses medicamentorum secundum usum eorum in aliis speciebus, praesertim hominibus, fundari debeant.27
Investigatio praeclinica in biomedicina qualitatem curae aegrotorum vel eventuum curationum emendare intendit. Attamen, eventus plerorumque studiorum animalium nondum ad homines translati sunt28,29,30. Una ex causis huius defectus translationis est neglegentia qualitati methodologicae studiorum animalium30. Ergo, propositum huius studii erat investigare num solutiones 30 μM NaHS in utribus aquaticis rattorum/murium paratae stabiles in aqua potabili per 12-24 horas manere possent, ut in quibusdam studiis affirmatum vel suggestum est.
Omnia experimenta in hoc studio secundum normas editas de cura et usu animalium laboratorium in Irania peracta sunt31. Omnes relationes experimentales in hoc studio etiam normas ARRIVE secutae sunt32. Commissio Ethica Instituti Scientiarum Endocrinarum, Universitatis Scientiarum Medicarum Shahid Beheshti, omnes modos experimentales in hoc studio probavit.
Zinci acetas dihydricus (CAS: 5970-45-6) et ferricum chloridum anhydricum (CAS: 7705-08-0) a Biochem, Chemopahrama (Cosne-sur-Loire, Gallia) empta sunt. Natrii hydrosulfidi hydricus (CAS: 207683-19-0) et N,N-dimethyl-p-phenylenediamine (DMPD) (CAS: 535-47-0) a Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA) empta sunt. Isofluranum a Piramal (Bethlehem, PA, USA) emptum est. Acidum hydrochloricum (HCl) a Merck (Darmstadt, Germania) emptum est.
Solutionem NaHS (30 μM) in aqua potabili para et statim in ampullas aquarias murium/rattorum infunde. Haec concentratio electa est secundum numerosas publicationes quae NaHS ut fontem H2S adhibent; vide sectionem Disputationis. NaHS est molecula hydrata quae varias quantitates aquae hydratationis (i.e., NaHS•xH2O) continere potest; secundum fabricatorem, proportio NaHS in nostro studio adhibita 70.7% erat (i.e., NaHS•1.3 H2O), et hunc valorem in computationibus nostris in rationem duxit, ubi pondus moleculare 56.06 g/mol, quod est pondus moleculare NaHS anhydrici, adhibuimus. Aqua hydratationis (etiam aqua crystallizationis appellata) est molecula aquae quae structuram crystallinam constituunt33. Hydrata proprietates physicas et thermodynamicas diversas habent comparata cum anhydritis34.
Antequam NaHS aquae potabilis addas, pH et temperaturam solventis metire. Statim solutionem NaHS in lagenam aquariam rattorum/murium in cavea animalium infunde. Exempla ex apice et ex interiore lagena aquaria horis 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 12, et 24 collecta sunt ad contentum sulfidi metiendum. Mensurae sulfidi statim post singulas collectiones captae sunt. Exempla ex apice tubi obtinuimus quia quaedam studia demonstraverunt parvam magnitudinem pororum tubi aquarii evaporationem H2S minuere posse15,19. Haec quaestio etiam ad solutionem in lagena pertinere videtur. Attamen, hoc non erat casus pro solutione in collo lagenae aquariae, quae maiorem evaporationis ratem habebat et autooxidationem faciebat; re vera, animalia hanc aquam primum biberunt.
In studio mures Wistar mares et feminae adhibiti sunt. Mures in caveis polypropylenis (2-3 mures per caveam) sub condicionibus normalibus (temperatura 21-26°C, humiditas 32-40%) cum 12 horis lucis (7:00-19:00) et 12 horis tenebrarum (7:00-7:00) habitabant. Mures liberum aditum ad aquam fontanam habebant et cibo normali (Khorak Dam Pars Company, Teheran, Iran) nutriebantur. Mures Wistar feminae (n=10, pondus corporis: 190-230 g) et mares (n=10, pondus corporis: 320-370 g) aetate comparati (6 menses) in greges testigo et greges NaHS (30 μM) tractatos (n=5 per gregem) temere divisi sunt. Ad magnitudinem exempli determinandam, methodum KISS (Keep It Simple, Stupid) adhibuimus, quae experientiam priorem et analysin potentiae coniungit. Primum studium experimentale in tribus muribus peractum est et medium gradum sulfidi totalis in sero et deviationem standardem (8.1 ± 0.81 μM) determinavimus. Deinde, considerando potentiam 80% et assumendo gradum significationis bilateralem 5%, magnitudinem exempli praeliminarem (n = 5 secundum litteras priores) determinavimus quae magnitudini effectus standardizatae 2.02 correspondebat cum valore praedefinito a Festing suggesto ad calculandam magnitudinem exempli animalium experimentalium35. Post multiplicationem huius valoris per deviationem standardizatam (2.02 × 0.81), magnitudo effectus detectabilis praedicta (1.6 μM) 20% erat, quae acceptabilis est. Hoc significat n = 5/gregem sufficientem esse ad mutationem mediam 20% inter greges detegendam. Muri temere divisi sunt in greges controlli et NaSH-tractati utentes functione fortuita programmatis Excel36 (Figura Supplementaria 1). Excaecatio in gradu exitus peracta est, et investigatores mensuras biochemicas agentes assignationes gregum nesciebant.
Greges NaHS utriusque sexus solutione NaHS 30 μM in aqua potabili praeparata per duas hebdomades tractati sunt; solutio recens singulis 24 horis suppeditata est, quo tempore pondus corporis mensuratum est. Exempla sanguinis ex apicibus caudarum omnium rattorum sub anaesthesia isoflurano alternis diebus post primam et secundam hebdomadem collecta sunt. Exempla sanguinis ad 3000 g per 10 min centrifugata sunt, serum separatum et ad –80°C conservatum est ad subsequentem mensurationem ureae, creatinini (Cr) et sulfidi totalis in sero. Urea in sero methodo enzymatica ureasis determinata est, et creatinina in sero methodo photometrica Jaffe determinata est, utens instrumentis commercialiter praesto (Man Company, Teheran, Iran) et analysatore automatico (Selectra E, numerus serialis 0-2124, Nederlandia). Coefficientes variationis intra- et inter-experimenta pro urea et Cr minus quam 2.5% erant.
Methodus caerulei methyleni (MB) adhibitur ad metiendum sulfurum totale in aqua potabili et sero NaHS continente; MB est methodus frequentissima adhibitorum ad metiendum sulfurum in solutionibus magnis et exemplaribus biologicis11,37. Methodus MB adhiberi potest ad aestimandam copiam sulfurum totalem38 et ad metienda sulfura inorganica in forma H2S, HS- et S2 in phase aquosa39. Hac methodo, sulfur praecipitatur ut sulfurum zinci (ZnS) in praesentia acetatis zinci11,38. Praecipitatio acetatis zinci est methodus latissime adhibita ad separanda sulfura ab aliis chromophoris11. ZnS redissolutum est utens HCl11 sub condicionibus valde acidis. Sulfidum reagit cum DMPD in ratione stoichiometrica 1:2 in reactione catalysata a chlorido ferrico (Fe3+ ut agens oxidans agit) ad formandum tincturam MB, quae spectrophotometrice detegitur ad 670 nm40,41. Limes detectionis methodi MB est circiter 1 μM11.
In hoc studio, 100 μL cuiusque exempli (solutionis vel seri) in tubum addita sunt; deinde 200 μL zinci acetati (1% w/v in aqua destillata), 100 μL DMPD (20 mM in 7.2 M HCl), et 133 μL FeCl3 (30 mM in 1.2 M HCl) addita sunt. Mixtura ad 37°C in tenebris per 30 min incubata est. Solutio ad 10,000 g per 10 min centrifugata est, et absorptio supernatantis ad 670 nm lecta est lectore microplacarum (BioTek, MQX2000R2, Winooski, VT, USA). Concentrationes sulfidi determinatae sunt utens curva calibrationis NaHS (0–100 μM) in ddH2O (Figura Supplementaria 2). Omnes solutiones ad mensuras adhibitae recens praeparatae sunt. Coefficientes variationis intra- et inter-experimenta pro mensuris sulfidi erant 2.8% et 3.4% respective. Etiam sulfidum totale recuperatum ex exemplaribus aquae potabilis et seri natrii thiosulfatum continentibus determinavimus, methodo exemplorum fortificatorum utentes42. Recuperationes pro exemplaribus aquae potabilis et seri natrii thiosulfatum continentibus erant 91 ± 1.1% (n = 6) et 93 ± 2.4% (n = 6), respective.
Analysis statistica peracta est utens programmate GraphPad Prism versione 8.0.2 pro Fenestra (GraphPad Software, San Diego, CA, USA, www.graphpad.com). Ad comparandam temperaturam et pH aquae potabilis ante et post additionem NaHS, probatio t parium adhibita est. Iactura H2S in solutione NaHS continenti calculata est ut decrementum percentuale ab absorptione basali, et ad diiudicandum utrum iactura statistice significativa esset, ANOVA unidirectionalem mensurarum repetitarum, deinde probationem comparationis multiplex Dunnett, perfecimus. Pondus corporis, urea serica, creatinina serica, et sulfidum sericum totale per tempus inter rattos moderatores et NaHS tractatos diversorum sexuum comparata sunt, utens ANOVA bidirectionali mixta (inter-intra) deinde probatione Bonferroni post hoc. Valores P bicaudati < 0.05 statistice significantes aestimati sunt.
pH aquae potabilis erat 7.60 ± 0.01 ante additionem NaHS et 7.71 ± 0.03 post additionem NaHS (n = 13, p = 0.0029). Temperatura aquae potabilis erat 26.5 ± 0.2 et decrevit ad 26.2 ± 0.2 post additionem NaHS (n = 13, p = 0.0128). Para solutionem NaHS 30 μM in aqua potabili et conserva in ampulla aquaria. Solutio NaHS instabilis est et eius concentratio tempore decrescit. Cum ex collo ampullae aquariae exempla sumerentur, significans decrementum (68.0%) intra primam horam observatum est, et contentum NaHS in solutione 72% et 75% post 12 et 24 horas respective decrevit. In exemplis ex ampullis aquariis obtentis, reductio NaHS non erat significativa usque ad 2 horas, sed post 12 et 24 horas 47% et 72% respective decreverat. Haec data indicant proportionem NaHS in solutione 30 μM in aqua potabili parata ad circiter quartam partem valoris initialis post horas 24 decrevisse, loco exemplorum non obstante (Figura 1).
Stabilitas solutionis NaHS (30 μM) in aqua potabili in ampullis rattis/muribus. Post praeparationem solutionis, exempla ex apice et interiore ampullae aquae sumpta sunt. Data exhibentur ut media ± deviatio standardis (n = 6/grex). * et #, P < 0.05 comparatum cum tempore 0. Photographia ampullae aquae apicem (cum apertura) et corpus ampullae ostendit. Volumen apicis est circiter 740 μL.
Concentratio NaHS in solutione 30 μM recens parata erat 30.3 ± 0.4 μM (ambitus: 28.7–31.9 μM, n = 12). Attamen, post 24 horas, concentratio NaHS ad valorem inferiorem decrevit (media: 3.0 ± 0.6 μM). Ut in Figura 2 demonstratur, concentrationes NaHS quibus mures expositi sunt non constantes erant per tempus studii.
Pondus corporis murium feminarum per tempus significanter auctum est (a 205.2 ± 5.2 g ad 213.8 ± 7.0 g in grege comparationis et a 204.0 ± 8.6 g ad 211.8 ± 7.5 g in grege NaHS tractato); nihilominus, curatio NaHS nullum effectum in pondus corporis habuit (Fig. 3). Pondus corporis murium masculorum per tempus significanter auctum est (a 338.6 ± 8.3 g ad 352.4 ± 6.0 g in grege comparationis et a 352.4 ± 5.9 g ad 363.2 ± 4.3 g in grege NaHS tractato); nihilominus, curatio NaHS nullum effectum in pondus corporis habuit (Fig. 3).
Mutationes ponderis corporis in rattis feminis et masculis post administrationem NaHS (30 μM). Data exhibentur ut media ± SEM et comparata sunt per analysin variantiae mixtam bidirectionalem (intra-intermediam) cum probatione post hoc Bonferroni. n = 5 utriusque sexus in utroque grege.
Concentrationes ureae et creatini phosphatis in sero per totum studium comparabiles erant in muribus comparationis et NaSH tractatis. Praeterea, curatio NaSH concentrationes ureae et creatinchromi in sero non affecit (Tabula 1).
Concentrationes sulfidi totalis in sero initiali comparabiles erant inter rattos mares (8.1 ± 0.5 μM contra 9.3 ± 0.2 μM) et feminas (9.1 ± 1.0 μM contra 6.1 ± 1.1 μM) NaHS tractatos, in grupo testigo et in rattis masculis. Administratio NaHS per quattuordecim dies nullum effectum in gradus sulfidi totalis in sero, sive in rattis masculis sive in rattis feminis, habuit (Fig. 4).
Mutationes in concentrationibus sulfidi totalis in sero rattorum masculorum et feminarum post administrationem NaHS (30 μM). Data exhibentur ut media ± SEM et comparata sunt utens analysi variantiae mixta bidirectionali (intra-intra) cum probatione Bonferroni post hoc. Utroque sexu, n = 5/grex.
Conclusio principalis huius studii est aquam potabilem NaHS continentem instabilem esse: tantum circiter quarta pars summae quantitatis sulfidi initialis post 24 horas a collectione ex apice et interiore ampullarum aquariarum rattorum/murium detegi potest. Praeterea, ratti concentrationibus NaHS instabilibus propter iacturam H2S in solutione NaHS expositi sunt, et additio NaHS aquae potabilis pondus corporis, uream sericam et chromium creatinum, nec summam sulfidi sericam affecit.
In hoc studio, proportio iacturae H2S ex solutionibus 30 μM NaHS in aqua potabili praeparatis erat circiter 3% per horam. In solutione tamponata (100 μM natrii sulfidi in 10 mM PBS, pH 7.4), concentratio sulfidi per tempus per 8 horas 7% decrevisse relata est. Antehac administrationem intraperitonealem NaHS defendimus referendo proportionem iacturae sulfidi ex solutione 54 μM NaHS in aqua potabili fuisse circiter 2.3% per horam (4%/hora in primis 12 horis et 1.4%/hora in ultimis 12 horis post praeparationem)8. Studia priora43 constantem iacturam H2S ex solutionibus NaHS invenerunt, praesertim propter volatilizationem et oxidationem. Etiam sine additione bullarum, sulfidum in solutione principali celeriter amittitur propter volatilizationem H2S11. Studia demonstraverunt per dilutionis processum, qui circiter 30-60 secundas durat, circiter 5-10% H2S propter evaporationem amitti6. Ad evaporationem H2S ex solutione prohibendam, investigatores plura consilia adhibuerunt, inter quae leni agitatione solutionis12, solutione principali pellicula plastica6 obtecta, et expositione solutionis ad aerem minuenda, cum celeritas evaporationis H2S ab interfacie aeris-liquidi pendeat.13 Oxidatio spontanea H2S praecipue ob iones metallorum transitionalium, praesertim ferrum ferricum, fit, quae sunt impuritates in aqua.13 Oxidatio H2S formationem polysulfidorum (atomi sulphuris vinculis covalentibus coniuncti)11 efficit. Ad oxidationem eius vitandam, solutiones H2S continentes in solventibus deoxygenatis praeparantur44,45 et deinde argone vel nitrogenio per 20-30 minuta purgantur ad deoxygenationem confirmandam.11,12,37,44,45,46 Acidum diethylenetriaminpentaaceticum (DTPA) est chelator metallorum (10-4 M) qui autooxidationem HS- in solutionibus aerobicis impedit. Absente DTPA, rata autooxidationis HS- est circiter 50% per circiter 3 horas ad 25°C37,47. Praeterea, cum oxidatio 1e-sulfidi luce ultraviolacea catalyzetur, solutio in glacie conservanda et a luce protegenda est11.
Ut in Figura 5 demonstratur, NaHS in Na+ et HS-6 dissociatur cum in aqua dissolvitur; haec dissociatio a pK1 reactionis determinatur, quae a temperatura pendet: pK1 = 3.122 + 1132/T, ubi T a 5 ad 30°C variat et gradibus Kelvin (K) metitur, K = °C + 273.1548. HS- pK2 altum habet (pK2 = 19), ita ad pH < 96.49, S2- non formatur aut in quantitatibus parvis formatur. Contra, HS- ut basis agit et H+ a molecula H2O accipit, et H2O ut acidum agit et in H2S et OH- convertitur.
Formatio gasis H2S dissoluti in solutione NaHS (30 µM). aq, solutio aquosa; g, gas; l, liquidum. Omnes calculi assumunt pH aquae = 7.0 et temperaturam aquae = 20°C. Creatum cum BioRender.com.
Quamquam indicia sunt solutiones NaHS instabiles esse, nonnulla studia animalium solutiones NaHS in aqua potabili ut compositum H2S donans adhibuerunt15,16,17,18,19,20,21,22,23,24,25,26 cum durationibus interventionis ab 1 ad 21 hebdomades variante (Tabula 2). Per haec studia, solutio NaHS renovata est singulis 12 horis, 15, 17, 18, 24, 25 horis vel 24 horis, 19, 20, 21, 22, 23 horis. Nostrae conclusiones demonstraverunt mures concentrationibus medicamenti instabilibus ob amissionem H2S ex solutione NaHS expositos esse, et contentum NaHS in aqua potabili murum per 12 vel 24 horas significanter fluctuasse (vide Figuram 2). Duo ex his studiis rettulerunt gradus H2S in aqua stabiles mansisse per 24 horas22 vel tantum 2-3% iacturas H2S per 12 horas15 observatas esse, sed data probantia vel mensuras non praebuerunt. Duo studia demonstraverunt diametrum parvum lagenarum aquariarum evaporationem H2S minuere posse15,19. Attamen nostrae conclusiones demonstraverunt hoc iacturam H2S ex lagena aquaria tantum 2 horis potius quam 12-24 horis morari posse. Utraque studia notant nos assumere gradum NaHS in aqua potabili non mutatum esse quia mutationem coloris in aqua non observavimus; ergo oxidatio H2S per aërem non significativa erat19,20. Mirum est, haec methodus subiectiva stabilitatem NaHS in aqua aestimat potius quam mutationem in eius concentratione per tempus metitur.
Iactura H2S in solutione NaHS cum pH et temperatura coniuncta est. Ut in nostro studio notatum est, NaHS in aqua dissolutio solutionem alcalinam efficit50. Cum NaHS in aqua dissolvitur, formatio gasis H2S dissoluti a valore pH pendet6. Quo inferior pH solutionis, eo maior proportio NaHS praesentis ut moleculae gasis H2S et eo plus sulfidi ex solutione aquosa amittitur11. Nullum horum studiorum pH aquae potabilis ut solventis pro NaHS adhibitae rettulit. Secundum commendationes OMS, quae a plurimis nationibus adoptantur, pH aquae potabilis in intervallo 6.5–8.551 esse debet. In hoc ambitu pH, celeritas oxidationis spontaneae H2S circiter decies augetur13. NaHS in aqua dissolutio in hoc ambitu pH concentrationem gasis H2S dissoluti ab 1 ad 22.5 μM efficiet, quod momentum monitorandi pH aquae antequam NaHS dissolvatur illustrat. Praeterea, ambitus temperaturae in studio supradicto relatus (18–26°C) mutationem in concentratione gasi H2S dissoluti in solutione circiter 10% efficeret, cum mutationes temperaturae pK1 immutent, et parvae mutationes in pK1 magnum impulsum in concentrationem gasi H2S dissoluti habere possint48. Accedit quod longa duratio quarundam studiorum (5 menses)22, per quam magna variabilitas temperaturae exspectatur, etiam hanc difficultatem exacerbat.
Omnia studia praeter unum21 solutionem NaHS 30 μM in aqua potabili adhibuerunt. Ad dosim adhibitam (i.e. 30 μM) explicandam, quidam auctores demonstraverunt NaHS in phase aquosa eandem prorsus concentrationem gasi H2S producere et ambitum physiologicum H2S esse 10 ad 100 μM, ergo hanc dosim intra ambitum physiologicum esse15,16. Alii explicaverunt 30 μM NaHS posse gradum H2S plasmatis intra ambitum physiologicum, i.e. 5–300 μM19,20, conservare. Nos concentrationem NaHS in aqua 30 μM (pH = 7.0, T = 20°C) consideramus, quae in quibusdam studiis ad effectus H2S investigandos adhibita est. Calculamus concentrationem gasi H2S dissoluti esse 14.7 μM, quae est circiter 50% concentrationis NaHS initialis. Hic valor similis est valori ab aliis auctoribus sub iisdem condicionibus computato13,48.
In nostro studio, administratio NaHS pondus corporis non mutavit; hoc resultat congruit cum resultatibus aliorum studiorum in muribus masculis22,23 et rattis masculis18; Attamen, duo studia rettulerunt NaSH pondus corporis imminutum in rattis nephrectomizatis restituisse24,26, dum alia studia effectum administrationis NaSH in pondus corporis15,16,17,19,20,21,25 rettulerunt. Praeterea, in nostro studio, administratio NaSH gradus ureae et creatini chromii in sero non affecit, quod congruit cum resultatibus alterius relationis25.
Studium invenit additionem NaHS aquae potabilis per duas hebdomades concentrationes totales sulfidi serici in muribus masculis et feminis non affecisse. Haec inventio congruit cum resultatis Sen et al. (16): octo hebdomades curationis cum 30 μM NaHS in aqua potabili gradus sulfidi plasmatici in muribus comparationis non affecerunt; tamen rettulerunt hanc interventionem gradus H2S imminutos in plasma murium nephrectomizatorum restituisse. Li et al. (22) etiam rettulerunt curationem cum 30 μM NaHS in aqua potabili per quinque menses gradus sulfidi liberi plasmatici in muribus senibus circiter 26% auxisse. Alia studia mutationes in sulfidis circulantibus post additionem NaHS aquae potabilis non rettulerunt.
Septem studia Sigma NaHS15,16,19,20,21,22,23 usum esse rettulerunt, sed plura de aqua hydrationis non praebuerunt, et quinque studia fontem NaHS in methodis praeparationis adhibitum non mentionem fecerunt17,18,24,25,26. NaHS est molecula hydrata et eius aquae hydrationis contenta variari potest, quod quantitatem NaHS requisitam ad solutionem molaritatis datae praeparandam afficit. Exempli gratia, contentum NaHS in nostro studio erat NaHS•1.3 H2O. Ergo, concentrationes actuales NaHS in his studiis minores esse possunt quam illae quae relatae sunt.
“Quomodo compositum tam brevis vitae effectum tam diuturnum habere potest?” Pozgay et al.21 hanc quaestionem posuerunt cum effectus NaHS in colitis in muribus aestimarent. Sperant studia futura hanc quaestionem respondere posse et coniecturam facere solutiones NaHS polysulfida stabiliora praeter H2S et disulfida quae effectum NaHS21 mediantur continere posse. Alia possibilitas est ut concentrationes NaHS perparvae in solutione manentes etiam effectum beneficum habere possint. Re vera, Olson et al. argumenta praebuerunt gradus micromolares H2S in sanguine non esse physiologicos et in ambitu nanomolari esse vel omnino absentes esse debere13. H2S per sulfatationem proteinorum agere potest, modificationem post-translationalem reversibilem quae functionem, stabilitatem et localizationem multarum proteinarum afficit52,53,54. Re vera, sub condicionibus physiologicis, circiter 10% ad 25% multarum proteinarum hepaticarum sulfylatae sunt53. Ambae investigationes celerem destructionem NaHS19,23 agnoscunt, sed mirum in modum affirmant "nos concentrationem NaHS in aqua potabili moderatos esse illud quotidie substituendo."23 Una investigatio casu affirmavit "NaHS esse donatorem H2S typicum et vulgo in praxi clinica ad ipsum H2S substituendum adhiberi."18
Disputatio supra ostendit NaHS ex solutione per volatilizationem, oxidationem et photolysim amitti, et ideo nonnullae suggestiones fiunt ad iacturam H2S ex solutione minuendam. Primo, evaporatio H2S ab interfacie gas-liquido13 et pH solutionis11 pendet; ergo, ad iacturam evaporativam minuendam, collum ampullae aquae quam minimum fieri potest, ut antea15,19 descriptum est, et pH aquae ad limitem superiorem acceptabilem (i.e., 6.5–8.551) aptari potest ad iacturam evaporativam minuendam11. Secundo, oxidatio spontanea H2S ob effectus oxygenii et praesentiam ionum metallicorum transitionalium in aqua potabili13 fit, ita deoxygenatio aquae potabilis cum argone vel nitrogenio44,45 et usus chelatorum metallorum37,47 oxidationem sulfidorum reducere potest. Tertio, ad photodecompositionem H2S impediendam, ampullae aquae charta aluminio involvi possunt; Haec praxis etiam ad materias lucis sensibiles, ut streptozotocinum55, pertinet. Denique, sales sulfidi inorganici (NaHS, Na2S, et CaS) per gavagiam administrari possunt potius quam in aqua potabili dissolvi, ut antea relatum est56,57,58; studia demonstraverunt natrii sulfidum radioactivum per gavagiam rattis administratum bene absorberi et ad fere omnes textus distribui59. Adhuc, pleraque studia sales sulfidi inorganici intraperitonealiter administraverunt; tamen, haec via raro in contextu clinico adhibetur60. Ex altera parte, via oralis est via administrationis frequentissima et praeferenda in hominibus61. Quapropter, commendamus ut effectus donatorum H2S in muribus per gavagiam oralem aestiment.
Limitatio est nos sulfidum in solutione aquosa et sero methodo MB mensurasse. Methodi ad sulfidum mensurandum includunt titrationem iodi, spectrophotometriam, methodum electrochemicam (potentiometriam, ampometriam, methodum coulometricam et methodum ampometricam) et chromatographiam (chromatographiam gasosam et chromatographiam liquidam altae efficaciae), inter quas methodus frequentissima est methodus spectrophotometrica MB. Limitatio methodi MB ad H2S in exemplaribus biologicis mensurandum est quod omnia composita sulfur continentia metitur, non autem H2S liberum, quia sub condicionibus acidis perficitur, quod extractionem sulphuris ex fonte biologico efficit. Attamen, secundum Societatem Americanam Salutis Publicae, MB est methodus standardis ad sulfidum in aqua mensurandum. Ergo, haec limitatio nostras principales conclusiones de instabilitate solutionum NaHS continentium non afficit. Praeterea, in nostro studio, recuperatio mensurarum sulfidi in exemplaribus aquae et serorum NaHS continentium 91% et 93% respective erat. Hi valores cum intervallis antea relatis (77–92)66 congruunt, praecisionem analyticam acceptabilem indicantes. Notandum est nos et mures mares et feminas adhibuisse secundum normas Institutorum Nationalium Salutis (NIH) ne nimiam fiduciam in studiis animalium tantum maribus destinatis in studiis prae-clinicis67 haberemus et ut, quotiescumque fieri posset68, mures mares et feminas includeremus. Hoc punctum ab aliis iam 69,70,71 confirmatum est.
Concludendo, ex hoc studio eventus apparet solutiones NaHS ex aqua potabili paratas ad H2S generandum propter earum instabilitatem non posse adhiberi. Haec via administrationis animalia gradibus NaHS instabilibus et inferioribus quam expectatis exponeret; ergo, haec inventa ad homines applicari non possunt.
Collectiones datorum in hoc studio adhibitae et/vel analysatae ab auctore correspondenti, si rationabile petatur, praesto sunt.
Szabo, K. *De chronologia investigationis hydrogenii sulfurati (H2S): a veneno ambientali ad mediatorem biologicum*. *Biochemia et Pharmacologia* 149, 5–19. https://doi.org/10.1016/j.bcp.2017.09.010 (2018).
Abe, K. et Kimura, H. Munus possibile hydrogenii sulfurati ut neuromodulatoris endogeni. *Journal of Neuroscience*, 16, 1066–1071. https://doi.org/10.1523/JNEUROSCI.16-03-01066.1996 (1996).
Chirino, G., Szabo, C. et Papapetropoulos, A. Munus physiologicum hydrogenii sulfidi in cellulis, textibus et organis mammalium. *Reviews in Physiology and Molecular Biology* 103, 31–276. https://doi.org/10.1152/physrev.00028.2021 (2023).
Dillon, KM, Carrazzone, RJ, Matson, JB, et Kashfi, K. Promissio evolvens systematum traditionis cellularis pro oxydo nitrico et hydrogenii sulfido: nova aetas medicinae personalisatae. Biochemistry and Pharmacology 176, 113931. https://doi.org/10.1016/j.bcp.2020.113931 (2020).
Sun, X., et al. Administratio diuturna donatoris hydrogenii sulfuris lente liberati potest ischaemiam/reperfusionem myocardialem impedire. Relationes scientificae 7, 3541. https://doi.org/10.1038/s41598-017-03941-0 (2017).
Sitdikova, GF, Fuchs, R., Kainz, W., Weiger, TM et Hermann, A. Phosphorylatio canalis BK sensibilitatem hydrogenii sulfurati (H2S) moderatur. *Frontiers in Physiology* 5, 431. https://doi.org/10.3389/fphys.2014.00431 (2014).
Sitdikova, GF, Weiger, TM et Hermann, A. Hydrogenium sulfuratum actionem canalis kalii (BK) calcio-activati ​​in cellulis tumoris pituitarii ratti auget. Archit. Pfluegers. 459, 389–397. https://doi.org/10.1007/s00424-009-0737-0 (2010).
Jeddy, S., et al. Hydrogenium sulfuratum effectum tutelarem nitriti contra laesionem ischaemiae-reperfusionis myocardialis in muribus diabeticis typi 2 auget. Oxidum Nitricum 124, 15–23. https://doi.org/10.1016/j.niox.2022.04.004 (2022).
Corvino, A., et al. *De inclinationibus in chemia donatorum H2S et eius effectu in morbos cardiovasculares*. *Antioxidantia* 10, 429. https://doi.org/10.3390/antiox10030429 (2021).
DeLeon, ER, Stoy, GF, et Olson, KR (2012). *De amissis passivis hydrogenii sulfidi in experimentis biologicis*. *Analytical Biochemistry* 421, 203–207. https://doi.org/10.1016/j.ab.2011.10.016 (2012).
Nagy, P., et al. Aspectus chemici mensurationum hydrogenii sulfidi in exemplaribus physiologicis. *Biochimica et Biophysical Acta* 1840, 876–891. https://doi.org/10.1016/j.bbagen.2013.05.037 (2014).
Kline, LL.D. Determinatio spectrophotometrica hydrogenii sulfidi in aquis naturalibus. Limnol. Oceanogr. 14, 454–458. https://doi.org/10.4319/lo.1969.14.3.0454 (1969).
Olson, KR (2012). *Educatio practica in chemia et biologia hydrogenii sulfidi*. “Antioxidantia.” *Redox Signaling*. 17, 32–44. https://doi.org/10.1089/ars.2011.4401 (2012).