Javascript in navigatro tuo in praesenti inactivum est. Quaedam huius situs interretialis functiones non operabuntur cum Javascript inactivum est.
Cum tuis specificis notitiis et medicamento specifico quod tibi placet, te inscribe, et nos informationes quas praebuisti cum articulis in amplissima nostra collectione coniungemus et exemplar PDF tibi statim per electronicam epistulam mittemus.
Granula Ban-Lan-Gen colitis chronicae recurrentis a dextrano natrii sulfato inductae in muribus attenuant per modulationem microbiotae intestinalis et restitutionem productionis SCFA Derived-GLP-1 intestinalis.
Jiao Peng, 1-3, *Li Xi, 4, *Zheng Lin, 3, 5 Duan Lifang, 1 Gao Zhengxian, 2, 5 Diehu, 1 Li Jie, 6 Li Xiaofeng, 6 Shen Xiangchun, 5 Xiao Haitao21Universitas Pequinensis, Nosocomium Shenzhenense, Departmentum Pharmaciae, Shenzhen, Res Publica Popularis Sinarum; 2Centrum Scientiae Salutis Universitatis Shenzhenense, Schola Pharmaciae, Shenzhen, Res Publica Popularis Sinarum; 3Universitas Medica Guizhouensis, Centrum Investigationis Technologiae Ingeniariae Medicinae Ethnicae et Medicinae Traditionalis Sinensis, Progressionis et Applicationis, Ministerium Educationis, Guizhouensis, Laboratorium Clave Pharmaciae Provinciae, Universitas Medica Guizhouensis, Guiyang, Res Publica Popularis Sinarum; 4 Departmentum Gastroenterologiae, Nosocomium Shenzhenense Universitatis Pequinensis, Shenzhen, Res Publica Popularis Sinarum; 5 Schola Pharmaciae, Universitas Medica Guizhouensis, Laboratorium Clave Functionis et Applicationis Plantarum Medicinalium, Guiyang; 6 Departmentum Medicinae Laboratoriae, Universitas Pekingensis, Nosocomium Shenzhen, Shenzhen, Sina [email protected] Shen Xiangchun, Schola Pharmaciae, Universitas Medica Guizhou, Guizhou, Res Publica Popularis Sinarum, 550004, Inscriptio electronica [email protected] Propositum: Therapia fundata in GLP-1 est nova optio curationis pro morbo inflammatorio intestinorum. Granula Ban-Lan-Gen (BLG) sunt formulatio TCM antiviralis nota quae potentialem actionem anti-inflammatoriam in curatione variarum condicionum inflammatoriarum exhibet. Attamen, effectus eius anti-inflammatorius in colitis et eius mechanismus actionis adhuc incerti sunt. METHODI: Ad colitis chronicam recidivantem a dextrano natrii sulfato (DSS) inductam in muribus constituendam. Indices actionis morbi, signa histologica laesionis, et gradus cytokinorum proinflammatoriorum peracti sunt ad effectum protectivum BLG aestimandum. Effectus BLG in microbiota intestinali et intestino characterizati sunt per gradus GLP-1 serici et expressionem Gcg, GPR41, et GRP43 colonicam, compositionem microbiota intestinali, gradus SCFA faecalium, et liberationem GLP-1 ex intestinis primariis. Cellulae epitheliales colonicae murinae ex SCFA productio GLP-1 derivata. Resultata: Curatio BLG significanter pondus corporis amittendum, DAI (Inhibition Adiposi Differentially Absorbing Influence), contractionem coli, damnum textus coli, et gradus cytokinorum proinflammatoriorum TNF-α, IL-1β, et IL-6 in textu coli minuit. Praeterea, curatio BLG expressionem Gcg colonicae, GPR41 et GRP43 et gradus GLP-1 serici in muribus colitis significanter restituere potest, et per augmentum bacteriorum SCFA producentium, ut Akkermansia et Prevotellaceae_UCG-001, et reductionem abundantiae bacteriorum, ut Eubacterium_xylanophilum_group, Ruminococcaceae_UCG-014, Intestinimonas et Oscillibacter. Accedit quod curatio BLG gradum SCFA in faecibus murium colitis significanter augere potest. Simul, experimenta in vitro etiam demonstraverunt extractum faecalem murium BLG tractatorum parvas cellulas epitheliales colonicas murinas primarias ad secernendum GLP-1 valde stimulare posse. Conclusiones: Haec inventa suggerunt BLG effectum anti-colitidem habere. BLG potentiam habet ut therapia evolvatur, saltem ex parte per modulationem microbiotae intestinalis et restitutionem productionis GLP-1 ex SCFA intestinali derivatae. Medicamenta promittentia pro colitis chronica recidivante. Verba Clavis: colitis, granula Ban-Lan-Gen, microbiota intestinalis, acida pinguia catenae brevis, GLP-1.
Colitis ulcerosa (CU) est morbus inflammatorius diuturnus coli et recti, diarrhoea recurrenti, dolore abdominis, deminutione ponderis, et faecibus cruentis mucopurulentis insignitus.1 Nuper, praevalentia CU aucta est in terris antea parvae incidentiae, inter quas Sina, cum crescente popularitate vitae occidentalis.2 Haec auctio problemata magna pro salute publica creat et implicationes graves habet pro facultate laborandi et qualitate vitae aegrotorum. Notandum est pathogenesis CU plerumque obscura manere, sed generaliter acceptum est geneticam, factores ambientales, microbiotam intestinalem, et systema immune omnia ad evolutionem CU conferre.3 Etiam nunc, nulla curatio est pro CU, et finis curationis est clinicē symptomata clinica moderari, remissionem inducere et conservare, sanationem mucosae promovere, et recidivationem reducere. Curationes classicae includunt aminosalicylata, corticosteroida, immunosuppressora, et biologica. Attamen, haec medicamenta effectum optatum consequi non possunt propter varios effectus secundarios.4 Nuper, multa studia casuum demonstraverunt medicinam traditionalem Sinensem (MTC) magnum potentialem demonstravisse in adiuvandis... ad ulcerosam colitis ulcerosae (UC) relevandam cum toxicitate humili, quod suggerit evolutionem novarum therapiae TCM esse strategiam curationis UC promittentem.5-7
Granula Banlangen (BLG) est praeparatio medicinae Sinensis traditionalis ex extracto aquatico radicis Banlangen facta.8 Praeter efficaciam antiviralem, BLG potentiam anti-inflammatoriam in curatione variarum condicionum inflammatoriarum exhibet.9,10 Praeterea, glucosinolata (R,S-goitrinum, progoitrinum, epiprorubinum et glucosidum ex extractis aquosis Radix isatidis) et nucleosida (hypoxanthinum, adenosinum, uridinum et guanosinum) et alcaloida indigo ut indigo et indirubinum isolata et identificata sunt.11,12 Studia priora bene documentaverunt composita adenosinum, uridinum et indirubinum potentes effectus anti-coliticos in variis exemplaribus animalibus colitis exhibere.13-17 Nihilominus, nulla studia in evidentia fundata peracta sunt ad efficaciam BLG in colite aestimandam. In hoc studio, effectum protectivum BLG in colitem chronicam recidivantem a dextrano natrii sulfato (DSS) inductam in muribus C57BL/6 investigavimus et invenimus... Administratio oralis BLG inflammationem chronicam recidivantem a DSS inductam in muribus significanter attenuavit, eius mechanismi regulatorii cum modulatione microbiota intestinali et restitutione productionis peptidi-1 glucagonis similis (GLP-1) ex intestino derivati ​​coniunguntur.
Granula BLG (sine saccharo, Z11020357 ab NMPA probata; Beijing Tongrentang Technology Development Co., Ltd., Beijing, Sina; numerus partis: 20110966) ex pharmacopoliis empta sunt. DSS (pondus moleculare: 36,000–50,000 Daltons) ex MP Biologicals (Santa Ana, USA) emptum est. Sulfasalazinum (SASP) (≥ 98% puritas), haematoxylinum et eosinum ex Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA) empta sunt. Instrumenta Elisa pro TNF-α, IL-1β et IL-6 luminex muris ex R&D systems (Minneapolis, MN, USA) empta sunt. Acidum aceticum, acidum propionicum, et acidum butyricum ex Aladdin Industries (Shanghai, Sina) empta sunt. Acidum 2-ethylbutyricum ex Merck KGaA (Darmstadt, Germania) emptum est.
Mures C57BL/6 mares, 6-8 hebdomadarum aetatis (pondus corporis 18-22 g), a Beijing Wetahe Laboratory Animal Technology Co., Ltd. (Beijing, Sina) empti et in ambitu 22 ± 2°C cum cyclo lucis/tenebrarum 12 horarum collocati sunt. Muribus victu rodentium communi cum libero accessu ad aquam potabilem per unam hebdomadam aliti sunt ut novo ambitu assuescerent. Deinde mures in quattuor greges temere divisi sunt: ​​grex testis, grex exemplaris DSS, grex SASP-tractatus (200 mg/kg, per os) et grex BLG-tractatus (1 g/kg, per os). Ut in Figura 1A demonstratur, secundum studium nostrum prius, colitis chronica recidivans experimentalis in muribus inducta est tribus cyclis 1.8% DSS per 5 dies, deinde aqua destillata per 7 dies, secundum studium nostrum prius. 18 Mures in gregibus SASP et BLG-tractatis SASP et BLG, respective, quotidie incipientibus a die 0 tractati sunt. Secundum experimenta praeliminaria, dosis... Dosis BLG ad 1 g/kg constituta est. Interea, dosis SASP ad 200 mg/Kg secundum litteras constituta est.4 Greges controlli et exemplaris DSS idem volumen aquae per totum experimentum acceperunt.
Figura 1. BLG colitis chronicae recidivantis a DSS inductae in muribus meliorat. (A) Designatio experimentalis colitis chronicae recurrentis et curationis, (B) mutatio ponderis corporis, (C) index activitatis morbi (DAI), (D) longitudo coli, (E) imago repraesentativa coli, (F) tinctio H&E coli (amplificatio, ×100) et (G) numerus histologicus. Data exhibentur ut media ± SEM (n = 6). ##p < 0.01 vel ###p < 0.001 contra gregem control (Con); *p < 0.05 vel **p < 0.01 vel ***p < 0.001 contra gregem DSS.
Pondus corporis, constantia faecum, et haemorrhagia ex recto quotidie notata sunt. Index activitatis morbi (IAM) determinatus est combinando notas ponderis corporis, constantiae faecum, et haemorrhagiae ex recto, ut antea descriptum est.19 Fine experimenti, omnes mures euthanasia necati sunt et sanguis, faeces et colon collecti sunt ad experimenta ulteriora.
Textus coli formalino fixatus et in paraffino inclusus est. Sectiones quinque micronum factae et haematoxylino-eosino (H&E) tinctae, deinde excaecatae et sicut antea descriptum est aestimatae sunt.19
RNA totalis textus coli extracta est per reagens Trizol (Invitrogen, Carlsbad, CA), deinde extractio cDNA per transcriptasem reversam (TaKaRa, Kusatsu, Shiga, Iaponia). PCR quantitativa per systema PCR temporis realis cum SYBR Green Master (Roche, Basilea, Helvetia) peracta est. Transcripta geni destinati ad β-actin normalizata sunt et data per methodum 2-ΔΔCT analysata sunt. Sequentiae primerorum genorum in Tabula 1 monstrantur.
Primaria isolatio et cultura cellularum epithelialis colonicarum murium sicut antea descriptum est peractae sunt.20 Breviter, colonia murium 6-8 hebdomadarum post sacrificium primum excisa sunt per dislocationem cervicalem, deinde longitudinaliter aperta, Hanks Balanced Salt Solution (HBSS, sine calcio et magnesio) tractata et in frusta 0.5-1 mm minuta secta. Deinde, textus cum 0.4 mg/mL collagenase XI (Sigma, Poole, UK) in medio DMEM libero digesta et centrifugata sunt ad 300 xg per 5 min ad temperaturam ambientem. Pellet in medio DMEM (supplemento 10% sero bovino fetali, 100 Unitatibus/mL penicillini, et 100 µg/mL streptomycini) ad 37°C resuspende et per reticulum nylon (magnitudo pororum ~250 µm) transi. Aliquotae cellularum epithelialis colonicarum in patellis fundo vitreo positae et cum acido acetico, acido propionico, acido butyrico, et extractis faecibus murinis incubatae sunt. Duae horae ad 37°C, 5% CO2.
Textus coli cum PBS homogeneizatus est, et gradus cytokinorum IL-6, TNF-α et IL-1β in textu coli detecti sunt utens apparatibus ELISA luminex (R&D systems, Minneapolis, MN, USA). Similiter, gradus GLP-1 in sero et medio culturae cellularum epithelialis colonicarum murinarum primarum determinati sunt cum apparatu ELISA (Bioswamp, Wuhan, Sina) secundum instructiones fabricatoris.
Totale DNA ex faecibus extractum est utens instrumento extractionis DNA (Tiangen, Sina). Qualitas et quantitas DNA mensuratae sunt rationibus 260 nm/280 nm et 260 nm/230 nm, respective. Deinde, utens unoquoque DNA extracto ut exemplari, initia specifica 338F (ACTCCTACGGGAGGCAGCAG) et 806R (GGACTACHVGGGTWTCTAAT) ad amplificandas regiones V3-V4 geni 16S rRNA in diversis regionibus adhibita sunt. Producta PCR purificata sunt utens instrumento QIAquick Gel Extraction Kit (QIAGEN, Germania), quantificata per PCR in tempore reali, et sequentiata utens suggestu sequentiationis IlluminaMiseq PE300 (Illumina Inc., CA, USA). Ad analysin bioinformaticam, processus datorum peractus est secundum protocolla antea relata.21,22 Breviter, utere Cutadapt (V1.9.1) ad filtrandas imagines expressas crudas. OTUs congregatae sunt utens UPARSE. (versio 7.0.1001) cum limine similitudinis 97%, et UCHIME adhibita est ad sequentias chimericas removendas. Analysis compositionis communitatis et classificatio peractae sunt utens classificatore RDP (http://rdp.cme.msu.edu/) innixo in basi datorum genorum RNA ribosomiali SILVA.
Gradus acidorum pinguium catenae brevis (acidi acetici, acidi propionici, et acidi butyrici) mensurati sunt sicut antea a Tao et al. descriptum est, cum quibusdam modificationibus.23 Breviter, 100 mg faecum primum suspensi sunt in 0.4 mL aquae deionizatae, deinde 0.1 mL acidi sulfurici 50% et 0.5 mL acidi 2-ethylbutyrici (norma interna), tum homogeneizati et ad 4°C calefacti. Centrifuga ad 12,000 rpm per 15 minuta ad C. Supernatans extractum est cum 0.5 mL aetheris et in GC iniectum est ad analysin. Ad analysin chromatographiae gasosae (GC), exempla analysata sunt utens chromatographo gasoso GC-2010 Plus (Shimadzu, Inc.) instructo detectore ionizationis flammae (FID). Separatio effecta est utens columna ZKAT-624, 30 m × 0.53 mm × 0.3 μm (Lanzhou Zhongke Antai Analytical Technology Co., Ltd., China). Data acquisita sunt utens programmate solutionis GC (Shimadzu, Inc.). Ratio divisionis erat 10:1, gas vector nitrogenium erat, et celeritas fluxus erat 6 mL/min. Volumen injectionis erat 1 μL. Temperatura injectoris et detectoris erat 300°C. Temperatura furni tenuta est ad 140°C per 13.5 minuta, deinde aucta est ad 250°C celeritate ... 120°C/min; temperatura per quinque minuta tenuta est.
Data ut media ± errore normali mediae (SEM) exhibentur. Significatio datorum per ANOVA unidirectionalem, deinde per probationem Duncanianam multiplicem intervallorum, aestimata est. Programma GraphPad Prism 5.0 (GraphPad Software Inc., San Diego, CA, USA) ad omnes computationes adhibitum est, et p < 0.05 statistice significans habitum est.
Bene notum est colitis chronica recidivans esse morbum colitis chronicum recidivantem cum dolore abdominis gravi, diarrhoea et sanguinatione. Ergo, colitis chronica recidivans a DSS inducta in muribus constituta est ad efficaciam anti-colitidis BLG aestimandam (Figura 1A). Comparati cum grege testigo, mures in grege DSS pondus corporis significanter imminutum et DAI altiorem habuerunt, et hae mutationes significanter reversae sunt post 24 dies curationis BLG (Figura 1B et C). Breviatio coli est signum grave UC. Ut in Figuris 1D et E demonstratur, longitudines coli murium qui DSS acceperunt significanter breviatae sunt, sed curatione BLG relevatae sunt. Deinde, analysis histopathologica peracta est ad inflammationem colonicam aestimandam. Imagines H&E tinctae et indices pathologici demonstraverunt administrationem DSS significanter architecturam colonicam perturbasse et destructionem cryptarum effecisse, dum curatio BLG destructionem cryptarum et indices pathologicos significanter minuit (Figura 1F et G). Notandum est effectum protectivum BLG dosi 1 g/Kg comparabilem esse cum effectu SASP dosi... dosis 200 mg/kg. Haec inventa simul suggerunt BLG efficax esse in minuenda gravitate colitidis chronicae recidivantis a DSS inductae in muribus.
TNF-α, IL-1β et IL-6 sunt indices inflammationis magni momenti inflammationis colonicae. Ut in Figura 2A demonstratur, DSS augmentum significans in expressione genica TNF-α, IL-1β et IL-6 in colon comparato cum grege testigo induxit. Administratio BLG has mutationes DSS-mediatas significanter invertere potest. Deinde, ELISA adhibuimus ad gradus cytokinorum inflammatoriorum TNF-α, IL-1β et IL-6 in textu coli determinandos. Resultata etiam demonstraverunt gradus colonicos TNF-α, IL-1β et IL-6 significanter auctos esse in muribus DSS tractatis, dum curatio BLG hos augmentum mitigavit (Figura 2B).
Figura 2. BLG expressionem genorum et productionem cytokinorum proinflammatoriorum TNF-α, IL-1β et IL-6 in colon murium DSS-tractatorum inhibet. (A) Expressio genorum TNF-α, IL-1β et IL-6 in colon; (B) Gradus proteinorum TNF-α, IL-1β et IL-6 in colon. Data ut media ± SEM (n = 4-6) exhibentur. #p < 0.05 vel ##p < 0.01 vel ###p < 0.001 contra gregem control (Con); *p < 0.05 vel **p < 0.01 contra gregem DSS.
Dysbiosis intestinalis in pathogenia colitis ulcerosae (UC) critica est.24 Ad investigandum utrum BLG microbiotam intestinalem murium DSS-tractatorum modulat, sequentiatio 16S rRNA peracta est ad communitatem bacterialem contentorum intestinalium analysandam. Diagramma Venn ostendit tres greges 385 OTUs communicare. Simul, quisque grex OTUs singulares habebat (Fig. 3A). Praeterea, index Chao1 et index Shannon in Figura 3B et C monstrati demonstraverunt diversitatem communitatis microbiotae intestinalis in muribus BLG-tractatis imminutam esse, cum index Shannon in grege BLG-tractato significanter diminutus esset. Analysis principalis componentium (PCA) et analysis principalis coordinatarum (PCoA) adhibitae sunt ad exemplaria coacervationis inter tres greges determinanda et demonstraverunt structuram communitatis murium DSS-tractatorum clare separatam esse post curationem BLG (Figura 3D et E). Haec data suggerunt curationem BLG structuram communitatis murium cum colitis DSS-inducta significanter affecisse.
Figura 3. BLG diversitatem microbiotae intestinalis in muribus cum colitis DSS-inducta mutat. (A) Diagramma Venn OTU, (B) Index Chao1, (C) Index divitiarum Shannon, (D) Diagramma punctorum Analyseos Principalis Componentis (PCA) OTU, (E) Figura punctorum Analyseos Coordinatarum Principalium OTU (PCoA). Data exhibentur ut media ± SEM (n = 6). **p < 0.01 contra gregem DSS.
Ad mutationes specificas in microbiota faecali aestimandas, compositionem microbiotae intestini in omnibus gradibus taxonomicis analyzavimus. Ut in Figura 4A demonstratur, phyla principalia in omnibus gregibus erant Firmicutes et Bacteroidetes, deinde Verrucomicrobia. Abundantiae relativae Firmicutum et proportiones Firmicutum/Bacteroidetum significanter auctae sunt in communitatibus microbialibus faecalibus murium DSS-tractatorum comparatis cum muribus testium, et hae mutationes significanter inversae sunt post curationem BLG. Praesertim, curatio BLG significanter abundantiam relativam Verrucobacterii in faecibus murium cum colitis DSS-inducta auxit. In gradu domestico, communitates microbiales faecales a Lachnospiriaceae, Muribaculaceae, Akkermansiaceae, Ruminococcaceae et Prevotellaceae occupatae sunt (Figura 4B). Comparata cum grege DSS, depletio BLG abundantiam Akkermansiaceae auxit, sed abundantiam Lachnospiraceae et Ruminococcaceae minuit. Notandum est, in gradu generis, communitates faecales... Microbiota a *Lachnospira_NK4A136_group*, *Akkermansia* et *Prevotellaceae_UCG-001* (Fig. 4C) occupatum est. Hoc inventum etiam demonstravit curationem BLG inaequalitatem microbiotae in responsione ad provocationem DSS efficaciter reversisse, quae diminutione *Eubacterium_xylanophilum_group*, *Ruminococcaceae_UCG-014*, *Intestinimonas* et *Oscillibacter*, et incremento *Akkermansiae* et *Prevotellaceae_UCG-001* insignita est.
Figura 4. BLG abundantiam microbiotae intestinalis in muribus colitis DSS-inductae mutat. (A) Abundantia microbiotae intestinalis ad gradum phyli; (B) Abundantia microbiotae intestinalis ad gradum familiae; (C) Abundantia microbiotae intestinalis ad gradum generis. Data exhibentur ut media ± SEM (n = 6). #p < 0.05 vel ###p < 0.001 contra gregem control (Con); *p < 0.05 vel **p < 0.01 vel ***p < 0.001 contra gregem DSS.
Cum acida pinguia catenae brevis (SCFA) sint metabolita principalia Akkermansiae et Prevotellaceae_UCG-001, dum acetas, propionatum et butyratum sint SCFA abundantissima in lumine intestinali,25-27 adhuc in studio nostro sumus. Ut in Figura 5 demonstratur, concentrationes acetas, propionatis et butyratis faecalis significanter redactae sunt in grege DSS-tractato, dum curatio BLG hanc reductionem plerumque supprimere potuit.
Figura 5. BLG gradus SCFA in faecibus murium cum colitis DSS-inducta auget. (A) Contentum acidi acetici in faecibus; (B) contentum acidi propionici in faecibus; (C) contentum acidi butyrici in faecibus. Data exhibentur ut media ± SEM (n = 6). #p < 0.05 vel ##p < 0.01 contra gregem control (Con); *p < 0.05 vel **p < 0.01 contra gregem DSS.
Porro coefficientem correlationis Pearsonianae inter SCFA differentiale ad gradum generis et microbiota faecalem calculavimus. Ut in Figura 6 demonstratur, Akkermansia positive cum productione acidi propionici (Pearson = 0.4866) et acidi butyrici (Pearson = 0.6192) correlata est. Contra, et Enteromonas et Oscillobacter negative cum productione acetati associatae sunt, cum coefficientibus Pearsonianis 0.4709 et 0.5104 respective. Similiter, Ruminococcaceae_UCG-014 negative cum productione acidi propionici (Pearson = 0.4508) et acidi butyrici (Pearson = 0.5842) respective correlata est.
Figura 6. Analysis correlationis Pearsonianae inter differentiales SCFAs et microbios colonicos. (A) Enteromonas cum acido acetico; (B) Bacillum concussionis cum acido acetico; (C) Akkermansia contra acidum propionicum; (D) Ruminococcus_UCG-014 cum acido propionico; (E) Akkermansia cum acido butyrico; (F) Ruminococcus_UCG-014 cum acido butyrico.
Peptidum-1 glucagoni simile (GLP-1) est productum post-translationale proglucagonis (Gcg) specificum cellulis cuius proprietates anti-inflammatoriae habent.28 Ut in Figura 7 demonstratur, DSS significantem diminutionem in expressione mRNA Gcg induxit. Curatio coli et BLG reductionem Gcg DSS-inductam significanter invertere potuit comparata cum grege testigo (Fig. 7A). Simul, gradus GLP-1 in sero significanter redactus est in grege DSS-tractato, et curatio BLG hanc reductionem magnopere impedire potuit (Fig. 7B). Cum acida pinguia catenae brevis secretionem GLP-1 per activationem receptoris 43 proteino G-copulati (GRP43) et receptoris 41 proteino G-copulati (GRP41) stimulare possint, etiam GPR41 et GRP43 in colon murium colitis examinavimus et invenimus expressionem mRNA colonicam GRP43 et GPR41 significanter diminutam esse post provocationem DSS, et curationem BLG has diminutiones efficaciter salvare potuisse (Figura 7C et D).
Figura 7. BLG auget gradus GLP-1 in sero et expressionem mRNA Gcg, GPR41 et GRP43 in colon in muribus DSS-tractatis. (A) Expressio mRNA Gcg in textu coli; (B) Gradus GLP-1 in sero; (C) Expressio mRNA GPR41 in textu coli; (D) Expressio mRNA GPR43 in textu coli. Data exhibentur ut media ± SEM (n = 5-6). #p < 0.05 vel ##p < 0.01 contra gregem control (Con); *p < 0.05 contra gregem DSS.
Cum curatio BLG gradus GLP-1 in sero, expressionem mRNA Gcg colonici, et gradus SCFA faecales in muribus DSS-tractatis augere posset, ulterius acetatum, propionatum, et butyratum necnon mures control (F-Con), DSS colitis (F-Con)-DSS) et BLG-tractati colitis (F-BLG) de liberatione GLP-1 ex cellulis epithelialibus colonicis murinis primariis examinavimus. Ut in Figura 8A demonstratur, cellulae epitheliales colonicis murinis primariae, quae cum acido acetico 2 mM, acido propionico, et acido butyrico respective tractatae sunt, liberationem GLP-1 significanter stimulaverunt, quod cum studiis prioribus congruit.29,30 Similiter, omnia F-Con, F-DSS, et F-BLG (aequivalentia 0.25 g faecum) liberationem GLP-1 ex cellulis epithelialibus colonicis murinis primariis magnopere stimulaverunt. Notandum est quantitatem GLP-1 a cellulis epithelialibus colonicis murinis primariis F-DSS-tractatis emissam multo inferiorem esse quam cellularum epithelialum colonicorum muribus primariis F-Con et F-BLG-tractatarum. Cellulae epitheliales colonicae muris (Figura 8B). Haec data suggerunt curationem BLG productionem GLP-1 ex SCFA intestinali derivatam significanter restituisse.
Figura 8 SCFA ex BLG derivatum emissionem GLP-1 ex cellulis epithelialibus colonicis murinis primariis stimulat. (A) Acidum aceticum, acidum propionicum, et acidum butyricum emissionem GLP-1 ex cellulis epithelialibus colonicis murinis primariis stimulaverunt; (B) extracta faecalia F-Con, F-DSS et F-BLG cellulas epitheliales colonicis murinis primariis stimulaverunt. Quantitas GLP-1 emissa. Partes cellularum epithelialum colonicorum in patellis Petri fundo vitreo positae et cum 2 mM acido acetico, acido propionico, acido butyrico, et extractis faecalibus F-Con, F-DSS, et F-BLG (aequivalentibus 0.25 g faecum) respective tractatae sunt. Duabus horis ad 37°C, 5% CO2, respective. Quantitas GLP-1 e cellulis epithelialibus colonicis murinis primariis emissa per ELISA detecta est. Data ut media ± SEM (n = 3) exhibentur. #p < 0.05 vel ##p < 0.01 contra inanem vel F-Con; *p < 0.05 contra F-DSS.
Abbreviationes: Ace, acidum aceticum; Pro, acidum propionicum; autem, acidum butyricum; F-Con, extractum faecale ex muribus comparationis; F-DSS, extractum faecale ex muribus colitis; F-BLG, ex colon BLG-tractato. Extracta faecalia murium inflammatoriorum.
Ab Organizatione Mundi Sanitarius ut morbus refractarius recensitus, UC periculum globale fit; Attamen, modi efficaces ad morbum praedicendum, prohibendum, et curandum adhuc limitati sunt. Ergo, urgente est necessitas novas strategias therapeuticas tutas et efficaces pro UC explorare et evolvere. Praeparationes medicinae Sinensis traditionalis optionem promittentem praebent, quia multae praeparationes medicinae Sinensis traditionalis per saecula in curatione UC in populatione Sinensi efficacia demonstratae sunt, et omnes sunt organica biologica et materiae naturales quae plerumque hominibus et animalibus innocuae sunt.31,32 Hoc studium destinatum est praeparationem medicinae Sinensis traditionalis tutam et efficientem ad curationem UC quaerere et eius mechanismum actionis explorare. BLG est formula herbaria Sinensis nota adhibita ad influenzam curandam.8,33 Opus in nostro laboratorio et aliis demonstravit indigum, productum medicinae Sinensis traditionalis processum ex eadem materia cruda ac BLG, efficaciam significantem in curatione UC in hominibus et animalibus exhibere.4,34 Attamen, effectus anti-colitidis BLG et eius mechanismus effectuum incertus est. In studio praesenti, nostrae conclusiones demonstrant BLG inflammationem colonicam DSS-inductam efficaciter attenuare, quae cum modulatione microbiota intestinalis et ... coniungitur. restitutio productionis GLP-1 ex intestinis derivatae.
Bene notum est colitis ulcerosa (UC) periodis recidivantibus cum notis clinicis typicis, ut amissione ponderis, diarrhoea, sanguinatio rectalis, et laesione ampla mucosae colonicae, insigniri.35 Itaque colitis chronica recidivans administrata est tribus cyclis DSS 1.8% per quinque dies administratis, deinde septem diebus aquae potabilis. Ut in Figura 1B demonstratur, fluctuatio ponderis amissi et DAI indices inductionem prosperam colitis chronicae recidivantis indicaverunt. Mures in grege BLG tractato recuperationem sursum ab octavo die ostenderunt, quae significanter differt a die vicesimo quarto. Eaedem mutationes etiam in indice DAI observatae sunt, emendationem in emendatione clinica colitis suggerentes. Quod ad laesionem coli et statum inflammatorium attinet, longitudo coli, laesio textus coli, et expressio genorum et productio cytokinorum proinflammatoriorum TNF-α, IL-1β, et IL-6 in textu coli etiam valde emendatae sunt post curationem BLG. Collectim, haec eventa clare demonstrant BLG efficax esse in curatione colitis chronicae recidivantis in muribus.
Quomodo BLG effectus suos pharmacologicos exercet? Multa studia priora demonstraverunt microbiotam intestinalem partes claves agere in pathogenia ulcerositatis colitis (UC), et therapiae microbiomati fundatae et microbiomati directae emerserunt ut strategia valde attractiva ad curationem UC. In hoc studio, demonstravimus curationem BLG mutationes significantes in compositione microbiotae intestinalis effecisse, suggerens effectum protectivum BLG contra colitis DSS-inductam cum modulatione microbiotae intestinalis coniunctum esse. Haec observatio congruit cum notione quod reprogrammatio homeostasis microbiotae intestinalis est accessus magni momenti ad intellegendam efficaciam praeparationum TCM.36,37 Notandum est Akkermansiam esse bacterium Gram-negativum et stricte anaerobium quod in strato muci intestini habitat, quod mucinas degradat, acidum propionicum producit, differentiationem cellularum caliciformium stimulat, et functionem mucosae integritatis claustri conservat.26 Plurima data clinica et animalium suggerunt Akkermansiam valde cum mucosa sana consociari,38 et administrationem oralem Akkermansiae spp. inflammationem mucosalem significanter emendare potest.39 Nostrae datae currentes suggerunt abundantiam relativam Akkermansiae significanter augeri post curationem BLG. Praeterea, Prevotellaceae_UCG-001 est bacterium SCFA producens.27 Plura studia demonstraverunt Prevotellaceae_UCG-001 in abundantia relativa parva in faecibus animalium cum colite inventam esse.40,41 Nostrae datae currentes etiam ostendunt curationem BLG abundantiam relativam Prevotellaceae_UCG-001 in colon murium DSS-tractatorum significanter augere posse. Contra, Oscillibacter est bacterium mesophilicum, stricte anaerobicum.42 rettulerunt abundantiam relativam Oscillibacter significanter augeri in muribus UC et significanter positive correlatam esse cum gradibus IL-6 et IL-1β et notis pathologicis.43,44 Notandum est curationem BLG abundantiam relativam Oscillibacter in faecibus murium DSS-tractatorum significanter reduxit. Notandum est haec bacteria BLG-mutata bacteria maxime SCFA producentia fuisse. Multa studia priora potentiam beneficam demonstraverunt... Effectus SCFA in inflammationem colonicam et protectionem integritatis epithelii intestinalis.45,46 Nostrae datae praesentes etiam observaverunt concentrationes SCFA acetati, propionatis, et butyratis in faecibus DSS-tractatis valde auctas esse in muribus BLG-tractatis. Haec inventa simul sumpta clare demonstrant curationem BLG efficaciter augere posse bacteria SCFA producentia DSS-inducta in muribus cum colitis chronica recidivante.
GLP-1 est incretinum praecipue in ileo et colon productum et partes magnas agit in evacuatione gastrica retardanda et glucoso sanguinis postprandiali deminuendo.47 Indicia suggerunt dipeptidyl peptidase (DPP)-4, agonistam receptoris GLP-1, et nanomedicinam GLP-1 inflammationem intestinalem in muribus efficaciter lenire posse.48-51 Ut in studiis prioribus relatum est, altae concentrationes SCFA cum gradibus GLP-1 plasmaticis in hominibus et muribus consociatae sunt.52 Nostra data currentes ostendunt post curationem BLG, gradus GLP-1 serici et expressionem mRNA Gcg significanter auctas esse. Similiter, secretio GLP-1 significanter aucta est in culturis colonicis post stimulationem cum extractis faecalibus ex muribus colitis BLG-tractatis comparata cum stimulatione cum extractis faecalibus ex muribus colitis DSS-tractatis. Quomodo SCFA emissionem GLP-1 afficiunt? Gwen Tolhurst et al. rettulerunt SCFA secretionem GLP-1 per GRP43 et GPR41 stimulare posse.29 Nostrae datae praesentes etiam ostendunt curationem BLG expressionem mRNA GRP43 et GPR41 in colon murium DSS-tractatorum significanter augere. Haec data suggerunt curationem BLG productionem GLP-1 a SCFA promotam restituere posse per activationem GRP43 et GPR41.
BLG est medicamentum diuturnum sine praescriptione (OTC) in Sinis. Maxima dosis BLG tolerata in muribus Kunming est 80g/Kg, et nulla toxicitas acuta observata est.53 Nunc, dosis BLG (sine saccharo) commendata in hominibus est 9-15 g/die (ter in die). Studium nostrum demonstravit BLG ad 1g/Kg colitis chronicae recurrentis a DSS inductae in muribus meliorasse. Haec dosis prope est dosi BLG clinicaliter adhibitae. Studium nostrum etiam invenit eius mechanismum actionis mediari, saltem ex parte, per alterationes in microbiota intestinali, praesertim bacteria SCFA producentia, ut Akkermansia et Prevotellaceae_UCG-001, ad productionem GLP-1 ex intestinis derivatam restituendam. Haec inventa suggerunt BLG ulteriorem considerationem mereri ut agens therapeuticum potentiale ad curationem colitis clinicam. Attamen, exactus mechanismus quo microbiota intestinale modulatur adhuc confirmandus est a muribus microbiota carentibus et transplantatione bacteriorum faecalium.
As, acidum aceticum; Butyrum, acidum butyricum; BLG, Pandanum; DSS, dextranum natrii sulfas; DAI, index activitatis morbi; DPP, dipeptidyl peptidasis; FID, detector ionizationis flammae; F-Con, control. Extracta faecalia murium; F-DSS, extracta faecalia murium DSS colitis; F-BLG, extracta faecalia murium BLG-tractatorum colitis; GLP-1, peptidum-1 simile glucagoni; Gcg, glucagonum; chromatographia gasosa, chromatographia gasosa; GRP43, receptor 43 cum proteino G copulatus; GRP41, receptor 41 cum proteino G copulatus; H&E, haematoxylinum-eosinum; HBSS, Solutio salis aequilibrata Hanks; OTC, OTC; PCA, analysis principalis componentium; PCoA, analysis coordinatarum principalium; Pro, acidum propionicum; SASP, sulfasalazinum; SCFA, acida pinguia catenae brevis; Medicina Sinensis, medicina traditio Sinensis; UC, colitis ulcerosa.
Omnia protocola experimentalia a Commissione Ethica Animalium Universitatis Pekingensis, Centri Medici Universitatis Scientiae et Technologiae Shenzhen-Hong Kong (Shenzhen, Sina), secundum Lineamenta Institutionalia et Regulamenta Animalium (numerus ethicus A2020157), probata sunt.
Omnes auctores contributiones significantes ad conceptionem et designum, acquisitionem datorum, vel analysin et interpretationem datorum contulerunt; in scriptura articuli vel in recensione critica contentorum intellectualium magni momenti participaverunt; consenserunt ut manuscriptum ad periodicum currentem submitterent; denique versionem ad publicationem probarunt; pro omnibus aspectibus operis responsabiles fuerunt.
Hoc opus a Fundatione Nationali Scientiarum Naturalium Sinarum (81560676 et 81660479), incepto primae classis Universitatis Shenzhenensis (86000000210), Pecunia Commissionis Innovationis Scientiae et Technologiae Shenzhenensis (JCYJ20210324093810026), et Pecunia Investigationis Scientiae et Technologiae Medicae Provinciae Guangdongensis (A2020157 et A2020272), Pharmacia Universitatis Medicae Guizhouensis Provinciae Guizhouensis a Laboratorio Clave Pecunia Sustentata (YWZJ2020-01) et Nosocomio Universitatis Pekingensis Shenzhenensis (JCYJ2018009) sustentatum est.
1. Tang B, Zhu J, Zhang B, et al. Potentia therapeutica triptolidi ut medicamenti anti-inflammatorii in colitis experimentali a dextrano natrii sulfato inducta in muribus. pre-immune. 2020;11:592084. doi: 10.3389/fimmu.2020.592084
2. Kaplan GG. Onus globale IBD: ab anno 2015 ad 2025. Nat Rev Gastroenterol Hepatol. 2015;12:720–727. doi: 10.1038/nrgastro.2015.150
3. Peng J, Zheng TT, Li Xue, et al. Alcaloida e plantis derivata: modificatores morbi promittentes in morbo inflammatorio intestinorum. Prepharmacology. 2019;10:351. doi:10.3389/fphar.2019.00351
4. Xiao Haiteng, Peng Jie, Wen B, et al. Indigo Naturalis accentum oxidativum colonicum et responsa Th1/Th17 in colitis DSS-inducta in muribus inhibet. Oxid Med Cell Longev. 2019;2019:9480945. doi: 10.1155/2019/9480945
5. Chen M, Ding Y, Tong Z. Efficacia et salus Sophorae flavescentis (Sophora flavescens) medicinae herbariae Sinensis in curatione colitis ulcerosae: evidentia clinica et mechanismi potentiales. Prepharmacology. 2020;11:603476.doi:10.3389/fphar.2020.603476
6. Cao Fang, Liu Jie, Sha Benxing, Pan HF. *De rebus naturalibus: medicamenta experimentaliter efficacia ad curationem morbi inflammatorii intestinorum.* Curr Pharmaceuticals. 2019;25:4893–4913. doi: 10.2174/1381612825666191216154224
7. Zhang C, Jiang M, Lu A. *Cogitationes de curatione adiuvante colitis ulcerosae cum medicina Sinensi tradita*. *Clinical Rev Allergy Immunization*. 2013;44:274–283. doi: 10.1007/s12016-012-8328-9
8. Li Zhongteng, Li Li, Chen TT, et al. Efficacia et securitas granulorum Banlangen in curatione influenzae temporalis: protocollum studii pro experimento aleatorio moderato. trial. 2015;16:126. doi: 10.1186/s13063-015-0645-x